降香叶挥发油成分分析及其抗菌、抗氧化活性研究

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降香(Dalbergia odorifera T.Chen)的心材是我国的一种传统名贵中药材,亦是一种名贵香料,其所含的挥发油成分具有很高的经济价值。长期以来心材的使用已经造成了降香资源利用的紧张,而降香叶作为一种相对的可再生资源可以缓解对这种资源的过度开发。本论文分析研究了简便、高效的降香叶挥发油的提取方法,并运用GC-MS检测了不同提取方法提取的降香叶挥发油的化学成分和相对含量;同时考察了降香叶挥发油对常见病原菌的抑制活性;并通过DPPH、β-胡萝卜素-亚油酸漂白、一氧化氮(NO)和还原力等抗氧化试验,确定了降香叶挥发油的抗氧化活性。结果如下:1.确立了水蒸气蒸馏法提取降香叶挥发油的最佳提取条件:固液比1:20,浸泡5h,150℃蒸馏20h,取上层精油,用无水乙醚溶解,无水硫酸钠干燥,得到棕黄色油状液体。降香叶挥发油提取率为1.30±0.03%。2.建立了GC-MS检测降香叶挥发油化学成分的分析方法,明确了降香叶挥发油的化学成分:气相色谱条件:色谱柱为Rtx-WAX(30m/0.25mm ID/0.25um df);柱温70℃,以10℃/min升温至200℃,停留3min以2℃/min升温至240℃,保持至结束;汽化室温度250℃;载气为高纯He;载气流量1.0ml/min:进样量为0.2μl;分流比1:10。质谱条件:离子源和连接杆温度分别为200和240℃;电子能量70eV;质量范围50-600amu。降香叶挥发油的主要成分按化学分类应属棕榈酸类和植酸类,其中n-棕榈酸53.49%,9E)-9-棕榈酸11.97%,植酸3.31%。3.确定了降香叶挥发油的抗菌活性1)通过对降香叶挥发油的抗菌活性研究,表明了降香叶挥发油对三种革兰氏阳性菌:枯草芽孢杆菌、金黄色葡萄球菌、白色葡萄球菌以及两种真菌:白色念珠菌、黑曲霉具有较好的抑制活性,其中对真菌白色念珠菌的抑制活性尤为显著。而对革兰氏阴性菌:大肠杆菌、变形杆菌、绿脓杆菌的抑制活性较弱;降香叶挥发油对革兰氏阳性菌生物膜内细菌抑制效果较好,而对革兰氏阴性菌生物膜内细菌抑制效果欠佳。杀菌曲线反映了挥发油的杀真菌作用呈浓度依赖和时间依赖的关系。2)降香叶挥发油抑制细菌生物膜活性与浓度为非线性关系。3)降香叶挥发油可促使生物膜表层的细菌死亡、脱落,进而降低细菌生物膜表层单位面积内细菌密度,利于人体免疫系统清除生物膜中存活的持留细胞。4.初步研究表明降香叶挥发油具有较好的抗氧化活性降香叶挥发油清除超氧自由基能力相对较强,其次为清除过氧自由基能力。还原能力试验表明降香叶挥发油具有较好的氢原子转移能力和清除羟自由基能力。DPPH.NO、p-胡萝卜素-亚油酸漂白和还原力试验数据IC50值分别为1.015、1.153、1.93和1.113mg/ml。
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