白额高脚蛛(Heteropoda venatoria)是广泛分布于全球热带以及副热带地区的室内最大型蜘蛛,其粗毒能使大部分昆虫致死。在本研究中我们通过构建白额高脚蛛毒腺cDNA文库,获得了该蜘蛛的部分转录组信息。通过对cDNA文库中富含半胱氨酸的EST序列进行生物信息学分析,结合同源序列比对的结果,可将白额高脚蛛中含6个半胱氨酸的ICK模体的毒素多肽分为8个家族,分别命名为Family A、B、C、D、E、F、G和H。这些家族毒素的共同特点是其前体肽的剪切,从N端到C端依次含有信号肽、中间肽以及成熟肽。并且各家族的信号肽区段、中间肽酶切位点和成熟肽半胱氨酸残基之间的氨基酸等都有明显的特征。通过电击采集白额高脚蛛粗毒液,将此粗毒液进行反相高效液相色谱层析分离,收集39个峰值的成分,用MALDI-TOF质谱技术检测分子量和纯度,共得到63个介于1000-7000Da的分子,经质谱鉴定其粗毒液中有6个成分纯度较高,质谱鉴定分子量分别为4581Da(18.4min)、4639Da(26.1min)、3272Da(37.2min)、3926Da(40.8min)、3919Da(44.9min)、3599Da(48.3min),其中分子量经鉴定为3272Da大小的毒素通过在所建文库中cDNA信息的BLASTX分析,表明其为白额高脚蛛毒素KJ1(κ appa-SPRTX-Hvle)。该毒素由29个氨基酸残基组成,根据与已知结构的同源性分析,预测其中的6个Cys以CI-CIV、CⅡ-CV、CIII-CVI的方式形成3对二硫键的ICK模体,其氨基酸序列为DDCGTLFSGCDTSKDCCEGYVCHLWCKYK,其相应的编码cDNA也从文库中鉴别出来。