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随着石油工业迅速发展,环境也面临污染问题。柴油是目前运输工具中使用最多的燃料之一,在其加工过程中,因其不合理的处置会导致土壤污染,使土壤环境严重破坏。在此形势下,修复工作也因此而开展。其中,微生物修复由于经济、有效并对环境破坏性小等优点,近年来发展尤为迅猛。本论文从北京通州区取土样,在实验室内制备长,宽,高均为1米的砂箱装置。之后模拟地下储油罐,人为进行历时一年的柴油污染,并从中均匀分布的各点取样,运用生物富集分离方法,得到4株降解柴油菌株。最后,以此土著菌为研究对象,研究柴油污染土壤的微生物修复。通过考虑菌株五个生长环境因素(温度、pH、氮、磷源营养元素、盐度),利用已筛选出的细菌对柴油污染土壤进行修复实验研究,主要成果如下:(1)通过直接分离、富集培养和纯化的方法,分离纯化得到4株以柴油为碳源进行生长的细菌:B-1、B-2、B-3、B-4;对其进行生理生化试验,结合16S rDNA全序列分析, 4株细菌鉴定结果为B-1为微杆菌属Microbacterium sp. B-2为短波单胞菌属Brevundimonas sp. B-3为Tetrathiobacter kashmirensis,B-4为假单胞菌属Pseudomonas sp.。其中,Tetrathiobacter kashmirensis是一株新确定的菌种,在柴油降解方面的研究还未有文献报道。B-4是典型的石油烃降解菌,已广泛用于石油烃降解。(2)室内摇床实验筛选得出B-3、B-4的最佳生长条件:温度25℃~30℃,pH值7~7.5,最适氮源NH4Cl,最适磷源K2HPO4或KH2PO4,盐浓度0.5%~5%。(3)两株菌对柴油的降解能力研究表明,B-3的降解能力优于B-4,柴油浓度低于0.378mg/g时,B-3的降解效率较低,浓度超过0.378mg/g后,降解效率随柴油浓度增加,B-3降解效率渐增强,达到60.98%。B-4的最适柴油浓度为0.252mg/g,其降解率为48.97%。当浓度超过这一范围,两株菌的降解率均下降。说明细菌自身有耐受范围,高浓度污染物,对细菌产生毒害,抑制微生物生长。(4)土体系的培养基情况,了解两株菌的降解性能。其整体降解率在30℃与35℃时降解效果好,B-3优于B-4。在低温范围20℃与25℃,实验进行15天左右时,B-3随温度升高,其降解率与其呈正相关,B-4同之。因此,在实际修复工程中,在15-20天左右时,为微生物补充营养物质,使其具充足营养发挥高效降解性能。