应用丝氨酸蛋白酶抑制剂A1预测前列腺癌内分泌治疗敏感性的研究

来源 :第二军医大学 | 被引量 : 0次 | 上传用户:zkinchow
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[目的]筛选内分泌激素治疗不同敏感性的前列腺癌(Prostate cancer, PCa)患者血液中存在的差异性表达蛋白,选取其差异最大的一种蛋白SerpinAl,在体外和体内不同水平检测SerpinA1和PCa内分泌治疗敏感性的关系,评价其作为预测此敏感性的准确度,探讨其作为PCa内分泌治疗敏感性预测标志物的可行性,为指导PCa内分泌治疗的个体化选择提供理论依据。[方法]1、选取转变时间<6个月的(内分泌治疗低敏感性)和转变时间>24月的(内分泌治疗高敏感性)的PCa患者各20例,应用iTRAQ定量蛋白质组学方法,筛选对内分泌治疗不同敏感性PCa患者血液差异性表达蛋白。根据质谱结果选取差异性最大蛋白SerpinA1。2、收集培养不同激素依赖水平PCa细胞系,RT-PCR检钡Serpin A1在不同激素依赖水平PCa细胞株中Serpin A1的mRNA表达差异,Western-blot检测Serpin A1的蛋白表达差异;ELISA检测不同前列腺癌细胞系上清液中SerpinA1含量;收集内分泌治疗不同敏感性PCa患者电切组织标本和血液标本,使用免疫组化和ELISA方法验证SerpinA1在内分泌治疗不同敏感性患者组织和血液中的表达水平。[结果]不同激素依赖水平PCa细胞培养成稳转PCa细胞系后,RT-PCR结及Western Blot检测结果显示非激素依赖PCa细胞系中SerpinAl的mRNA及蛋白均高于激素依赖PCa细胞系;在不同PCa细胞系上清中均检测到在Serpin A1蛋白的存在,证实其是一种分泌型蛋白;电切组织标本中,内分泌治疗高敏感性的PCa患者Serpin A1含量较多;检测了转变时间>24月的PCa患者(内分泌治疗高敏感性)和转变时间<6月的PCa患者血液中Serpin A1的不同表达水平。[结论]Serpin A1与PCa内分泌治疗敏感性密切相关,是预测PCa内分泌治疗敏感性的潜在生物学标志物。
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