环加氧酶在碱性成纤维细胞生长因子引起小鼠脑微血管内皮细胞增殖中的作用和意义

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血管新生(angiogenesis)是血管内皮纽胞(EC)特别是微血管内皮细胞(MVEC)在原有血管的基础上通过增殖、迁移及分化等一系列复杂的生物学反应而形成新血管网的过程.血管新生的机制至今尚未阐明.该研究所用bEnd.3是收录在ATCC(American Type Culture Collection)一个体外细胞培养株,经我们鉴定和研究,bEnd.3的vW因子、 CD34阳性;CD36、CD105等也有不同程度的表达;存在管腔样结构(TLS)以及毛细血管样网络;细胞表面有丰富微绒毛,所以是一种MVEC.MVEC增殖是血管新生中一个十分重要的环节,碱性成纤维细胞生长因子(bFGF)是一种促血管新生因子,对血管新生多个环节都有直接或间接作用,能明显引起多种MVEC的增殖,以前的研究认为bFGF的这一作用主要是通过bFGF结合MVEC细胞膜FGFR2 Ⅲ c受体后通过一系列的信号转导途径活化细胞周期蛋白而完成的.近几年的一些研究发现环加氧酶(COX)参与bFGF引起的血管新生,以此为线索,该文研究了COX在bFGF引起的MVEC增殖中的作用及动态变化,同时也进一步深入研究了bFGF对MVEC分泌PGE<,2>和VEGF的影响及意义.该文主要使用:高通量血管新生基因芯片检测、MTT试验、RT-PCR、Western blot、免疫细胞化学染色、ELISA等研究方法.研究结果发现:bFGF(10 ng/ml)作用bEnd.3 2h后Adamts1、MMP-9、Ang-1、PDGF B、G-CSF、FGF16、IGF-1、VEFGR、FGFR3、FGFR4等具有促血管新生作用的基因表达明显上调,而TIMP-2等具有抗血管新生作用的基因表达则明显下调,同时TSP-3、CD36、INF-β1等抗血管新生作用的基因也明显上调.结论:1.bFGF可以通过:bFGF→COX-2→PGE<,2>→VEGF途径引起MVEC增殖,从而促进血管新生;COX-2促进bEnd.3增殖;2.bFGF通过上调COX-2表达,bFGF的非特异性促细胞增殖作用转化为VEGF的特异性促MVEC增殖作用.
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