论文部分内容阅读
肺癌是全球发病率和死亡率最高的癌症,迄今为止没有有效治疗药物,筛选出安全有效药物仍是是当务之急。本课题以齐墩果酸为研究对象,通过衍生物合成、结构确证及对非小细胞肺癌细胞株A549的作用等方面研究,获得如下研究结果1.筛选出了2个齐墩果酸新衍生物的合成路线及其最佳合成条件以齐墩果酸为原料,通过氧化、鲍奇还原胺化、缩合等反应,引入氮杂环化合物,合成了齐墩果酸新衍生物QDGS-6,通过酯化反应合成了齐墩果酸新衍生物QDGS-7。齐墩果酸新衍生物QDGS-6最佳合成条件为3-氨基-12-烯-28-齐墩果酸:（3,5,6-三甲基吡嗪-2-基）甲酸的投料比为1:2,反应温度为25℃,反应时间为24 h,产率为71.2%。齐墩果酸新衍生物QDGS-7最佳合成条件为投料比为齐墩果酸:去甲斑蝥素=1:4,反应温度为90℃,反应时间为8 h。产率为77.9%。2.初步完成了2个齐墩果酸新衍生物的结构确证化合物QDGS-6:MS[C38H57N3O3]+,theoretical m/z of[M+H]+=605.44,measured m/z of[M+H]+=604.90;ES-MS of[C38H57N3O3]-:theoretical m/z of[M-H]-=603.44,measured m/z of[M-H]-=602.84。1H NMR（600 MHz,CDCl3）δ8.03（d,J=10.1 Hz,1H）,5.31（s,1H）,3.81（td,J=10.3,5.6 Hz,1H）,2.93（s,3H）,2.85（dd,J=13.6,3.6 Hz,1H）,2.55（d,J=22.3 Hz,6H）,2.01（dd,J=13.4,10.2 Hz,1H）,1.961.87（m,2H）,1.841.71（m,2H）,1.721.56（m,8H）,1.52（t,J=12.7 Hz,1H）,1.39（ddd,J=34.5,28.1,12.5 Hz,3H）,1.301.02（m,8H）,1.010.90（m,15H）,0.80（s,3H）。13C NMR（151 MHz,CDCl3）δ183.60,164.48,153.83,151.36,147.47,143.70,139.24,122.52,56.60,56.06,47.64,46.59,45.93,41.66,41.01,39.28,38.97,37.96,37.04,33.86,33.08,32.62,32.47,30.68,28.68,27.70,25.91,25.42,23.61,23.40,23.00,22.86,21.90,21.56,18.63,17.15,16.61,15.31,确证为3-N-（3,5,6-三甲基吡嗪-2-甲酰基）-齐墩果酸。化合物QDGS-7:MS[C38H56O7]-,theoretical m/z of[M-H]-=623.4,measured m/z of[M-H]-=623.64,初步确证为3-去甲基斑蝥素-齐墩果酸。3.发现了齐墩果酸新衍生物QDGS-6和QDGS-7具有抑制非小细胞肺癌A549增殖和诱导其凋亡作用,并优于先导化合物齐墩果酸。以5-氟尿嘧啶为阳性药物,采用CCK-8、EdU、流式细胞术等方法观察了齐墩果酸新衍生物QDGS-6和QDGS-7对非小细胞肺癌A549增殖和凋亡作用的影响。发现QDGS-6和QDGS-7对非小细胞肺癌A549具有增殖抑制和诱导凋亡作用,随着浓度的增加,非小细胞肺癌A549细胞逐渐变圆,抑制作用增强。增强Caspase 3的酶活性可能是其诱导凋亡的机制之一。同时发现QDGS-6和QDGS-7对A549的增殖抑制能力优于齐墩果酸与5-氟尿嘧啶,细胞水平上安全性好于齐墩果酸与5-氟尿嘧啶。且QDGS-7对A549细胞的增殖抑制活性好于QDGS-6。