目的:探讨二甲基甲酰胺（DMF）对H9c2心肌细胞膜损伤的影响及其可能的机制。方法:取体外培养H9c2心肌细胞,以浓度为0、25、50、75、100、125、150、175、200 mmol/L DMF处理24 h后,采用CCK-8法检测细胞存活率。根据CCK-8实验结果,以细胞存活率大于70%为原则,为观察剂量-效应关系,设立对照组和80、110、140 mmol/L组,分别给予浓度为0、80、110、140 mmol/L DMF染毒处理24h;为观察时间-效应关系,设立对照组和2、6、12、24 h组,给予浓度为110 mmol/L DMF分别染毒处理0、2、6、12、24 h。比色法检测培养上清LDH活性反映细胞膜完整性,荧光偏振法检测细胞膜荧光偏振度反映细胞膜流动性,流式细胞术检测细胞FDA+/PI+率反映细胞膜通透性,荧光法检测细胞膜胆固醇浓度,钙离子成像技术检测细胞内Ca²⁺浓度。结果:与对照组比较,100、125、150、175、200 mmol/L组细胞存活率均降低（P<0.01）,存在剂量-效应关系（P<0.01）。与对照组比较,80、110、140 mmol/L组LDH活性均升高（P<0.01）,2、6、12 h组LDH活性均升高（P<0.05）,存在剂量-效应关系（P<0.01）和时间-效应关系（P<0.01）。与对照组比较,80、110、140 mmol/L组荧光偏振度均升高（P<0.01）,6、12、24 h组荧光偏振度均升高（P<0.01）,存在剂量-效应关系（P<0.01）和时间-效应关系（P<0.01）。与对照组比较,80、110 mmol/L组FDA+/PI+率均升高（P<0.01）,6、12、24 h组FDA+/PI+率均升高（P<0.05）,存在时间-效应关系（P<0.01）;与对照组比较,110、140 mmol/L组PI+率均升高（P<0.01）,12、24 h组PI+率均升高（P<0.05）,存在剂量-效应关系（P<0.01）和时间-效应关系（P<0.01）。与对照组比较,80、110、140 mmol/L组胆固醇浓度均升高（P<0.01）,6、24 h组胆固醇浓度均升高（P<0.05）,存在剂量-效应关系（P<0.01）和时间-效应关系（P<0.01）。与对照组比较,80、110、140 mmol/L组Ca²⁺浓度均升高（P<0.01）,2、6、12、24 h组Ca²⁺均升高（P<0.05）,存在剂量-效应关系（P<0.01）和时间-效应关系（P<0.01）。在DMF染毒浓度为0²00 mmol/L时,LDH活性与荧光偏振度呈正相关（r=0.97,P<0.01）,与胆固醇浓度呈正相关（r=0.94,P<0.01）,与Ca²⁺浓度呈正相关（r=0.68,P<0.05）;在DMF染毒时间为0²4 h时,LDH活性与荧光偏振度呈正相关（r=0.89,P<0.01）,与FDA+/PI+率呈正相关（r=0.95,P<0.01）,与胆固醇浓度呈正相关（r=0.88,P<0.01）,与Ca²⁺浓度呈正相关（r=0.66,P<0.05）。结论:二甲基甲酰胺对H9c2心肌细胞膜造成损伤;膜流动性降低、膜通透性增加、膜胆固醇稳态失衡以及细胞内钙超载参与损伤过程。