【摘 要】
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目的:胎盘娩出后妊娠期糖尿病(gestational diabetes mellitus,GDM)伴随的病理生理改变随即减退或消失。因此可以认定胎盘在GDM的病理改变中起着至关重要的作用。本研究通过
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目的:胎盘娩出后妊娠期糖尿病(gestational diabetes mellitus,GDM)伴随的病理生理改变随即减退或消失。因此可以认定胎盘在GDM的病理改变中起着至关重要的作用。本研究通过探讨GDM胎盘中micro RNA(miRNA)及其相应靶基因的差异表达,并同时探究miR-138-5p及其靶基因TBL1X在GDM发生发展中的作用,以期为GDM的致病机制提供理论依据。方法:运用RNA-sequencing(RNA-seq)方法对8例GDM胎盘和8例正常组胎盘样本进行了miRNA及m RNA测序,获得GDM和对照组miRNA及m RNA表达谱。应用real-time PCR技术验证差异表达miRNA以及m RNA。应用划痕试验、transwell实验以及CCK-8检测细胞迁移以及增殖能力的改变。应用双荧光素报告酶实验验证TBL1X是miR-138-5p的靶基因。结果:1)共筛选到281个差异miRNA以及32个差异m RNA,其中204个m RNA以及9个miRNA在GDM胎盘组织中上调,77个m RNA以及23个miRNAs在胎盘组织中下调。2)运用real-time PCR技术在20例GDM胎盘以及18例正常胎盘独立样本中进行验证,被选为验证的6个miRNA以及10个m RNA中,5miRNAs以及8 m RNAs验证成功,包括5个上调的m RNAs(TBL1X,NOTUM,FRMD4A,SLC16A2 and CLDN19)以及1个下调的miRNA(miR-202-5p),3个下调的m RNAs(CCL18,HTRA1,SLC39A6)和4个下调的miRNAs(miR-138-5p,miR-210-5p,miR-3158-5p and miR-4732-3p)。3)通过对配对的miRNAs/m RNAs进行生物信息学分析,其功能主要涉及细胞发育及功能、器官形态等方面。3)miR-138-5p通过结合靶基因TBL1X改变滋养层细胞的迁移以及增殖功能。4)胎盘中miR-138-5p与TBL1X表达水平与母体血糖水平及胎盘重量相关。结论:本研究首次获得了GDM胎盘组织中差异miRNA及m RNA表达谱。同时深入阐述了miR-138-5p及其靶基因TBL1X在GDM病理机制中的作用。
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