[目的] 探讨羟基喜树碱(hydroxycamptothecin, HCPT)联用5-氟脲嘧啶(5-FU)、γ-干扰素(γ-IFN)对胃癌MGC-803细胞株的诱导凋亡、抗增殖作用及凋亡相关基因表达的影响。 [方法] [1]通过MTT比色法测定羟基喜树碱、5-氟脲嘧啶、γ-干扰素及联合用药对胃癌MGC-803细胞生长的抑制作用。[2]通过倒置显微镜观察凋亡细胞的形态学改变。[3]通过透射电镜观察凋亡细胞的形态学改变。[4]通过吖啶橙/溴化乙锭荧光染色方法观察凋亡细胞的形态学改变。[5]通过原位细胞凋亡检测(TUNEL)法定量检测药物诱导细胞凋亡的情况。[6]通过免疫细胞化学法测定Ki-67、Bcl-2、Bax的阳性表达率。深入研究药物对胃癌MGC-803细胞株抗增殖、诱导凋亡及其凋亡相关基因蛋白在凋亡前后的影响。 [结果] (1)MTT比色法结果显示：HCPT在0.5～50μg/ml范围内(其IC50为12μg/ml)，5-Fu在2～25μg/ml范围内，丫-IFN在1000～15000μ/ml范围内对胃癌MGC-803细胞均有抑制作用，并表现出浓度依赖性关系，不同浓度间的抑制率均有显著性差异(P<0.05或P<0.01)，三种药物联合(联合用药组)使用时，其抑制率也表现出明显的量效关系，各组间有显著性差异(P<0.05或P<0.01)，并且联合用药I(HCPT12μg/ml+5-Fu25μg/ml+丫-IFN15000μ/ml)/3]组与之对应的单药的3倍浓度量组相比有显著性差异(P<0.05或P<0.01);(2)透射电镜观察结果:在电镜下可观察到凋亡细胞微绒毛消失，胞浆有空泡出现，细胞染色质固缩并凝结成块，聚集在核膜周边，凋亡小体形成;(3)荧光染色观察结果:凋亡细胞核染色质呈橘红色固缩状，胞质收缩使细胞成球形;(4)TUNEL法检测结果:各种药与联合用药组均诱导胃癌MGC一803细胞凋亡，细胞凋亡率随药物浓度增加而明显上升，显示明确的量效关系。当作用48h时凋亡率达高峰，之后随时间延长而有所下降，各药组凋亡率与前一小组相比大部分有显著性差异(P<0.05或P<0 .01)，联合用药组A、B、C、D组与之对应的单药的3倍浓度量组相比，除部分时间、浓度间无显著性差异(P>0.05)外，其余不同时间、不同浓度间均有显著性差异(P<0.05或P<0.01)，联合用药B、C、D组与之对应的单药组相比，各时间段均有显著性差异(P<0.01);(5)ki一67抗增殖作用的检测结果:各种药与联合用药组均抑制胃癌MGC一803细胞增殖，表现出浓度、时间依赖性关系，除个别浓度与个别时间之间无显著性差异(P>0.05)外，不同浓度与不同作用时间之间均有显著性差异(P<0.05或P<0 .01)，联合用药组A、B、C、D组与之对应的单药的3倍浓度量组相比，大部分各时间、各浓度间均有显著性差异(P<0 .05或P<0 .01)。联合用药B、C、D组与之对应的单药组相比，各时间段均有显著性差异伊<0.01);(5)Bcl一2和Bax基因在凋亡前后的表达：12gb羟基喜树碱作用MGC｛03细胞48h之后，明显下调BC12基因蛋白表达和上调Bax基因蛋白表达。实验结果表明： 门）羟基喜树碱、5一氟腺晓晚、Y一干扰素均对胃癌MGC－803细胞株有诱导凋亡和抗增殖作用；（二）联合用药组（羟基喜树碱十5．氟腺晓晚十Y一干扰素）对胃癌MGC｛03细胞株有诱导凋亡和抗增殖作用；Q）羟基喜树碱诱导胃癌MGC｛03细胞株凋亡的分子生物学机制可能与下调抑制凋亡基因Bcl．2表达和上调促凋亡基因Bax表达有关。