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目的：Docetaxel是治疗激素非依赖性前列腺癌的一线化疗药物，通过促进细胞内微管聚集，诱导细胞阻滞于G2/M期并诱导细胞凋亡挥抗肿瘤效果。在临床实际应用过程中Docetaxel对激素非依赖性前列腺癌显示出明显的治疗效果，但也存在出现获得性耐药等常现难题。因此，基于公认的药物靶点，寻找具有更强抗肿瘤活性的药物一直是本领域的研究重点和热点。前期研究显示新型紫杉烷类化合物Lx2-32c对微管蛋白的促聚合能力显著强于Docetaxel，提示Lx2-32c可能对前列腺癌显示出更强的抗增殖活性。本研究将通过较系统的体外、体内抗肿瘤模型明确Lx2-32c对前列腺癌的生长抑制活性，并在此基础之上探索其发挥作用的机制。 方法：1、使用MTT法检测Lx2-32c对细胞增殖的影响，并计算半数抑制浓度(IC50)；2、使用Honchest33324标记细胞核或使用免疫荧光染色法标记细胞内的微管，在荧光显微镜下观察Lx2-32c对细胞核形态及细胞内微管的影响；3、使用流式细胞仪检测并分析化合物对细胞周期及细胞凋亡的影响；4、使用Western blot法检测Lx2-32c对细胞内凋亡相关蛋白ATF3、P53及细胞凋亡标记物cleaved-PARP表达的影响；5、建立异体移植瘤模型检测Lx2-32c对前列腺癌细胞体内移植瘤生长的影响；6、使用siRNA沉默LNCaP细胞内的ATF3，观察ATF3对Lx2-32c细胞增殖抑制活性的影响。结果：1、MTT实验结果显示：Lx2-32对LNCaP、PC3、DU145、RM-1前列腺癌细胞的IC50值分别为2.57±0.71 nM、2.94±0.57 nM、7.17±1.28 nM及4.22±0.39 nM；Docetaxel对上述细胞的IC50值分别为4.41±1.64 nM、9.37±2.30 nM、11.89±1.56 nM、12.45±2.89 nM。表明Lx2-32c对多种前列腺癌均具有明显的增殖抑制能力；2、荧光显微镜观察结果显示：与对照组细胞相比，Lx2-32c组及Docetaxel组细胞的细胞核出现明显的碎裂现象；Lx2-32c组及Docetaxel组细胞微管形态出现异常变化，细胞内微管呈束状分布，少数细胞缩小成明亮的绿色小球状。表明Lx2-32c具有促进前列腺癌细胞微管聚集并诱导凋亡的能力。3、流式细胞仪分析结果显示：与对照组细胞相比，Lx2-32c及Docetaxel作用24 h后处于G2/M期细胞的比例明显升高；作用48 h后处于sub-G0期细胞的比例显著增高。表明Lx2-32c具有阻滞前列腺癌细胞周期于G2/M期的能力。4、Western blot结果显示：与对照组细胞相比，Lx2-32c及Docetaxel可以显著升高细胞内cleaved-PARP蛋白的表达；并可诱导LNCaP细胞内ATF3及P53的表达升高。表明Lx2-32c具有诱导细胞凋亡的能力。5、在小鼠前列腺癌细胞RM-1体内移植瘤模型中，Docetaxel在10 mg/kg剂量的肿瘤抑制率为47％；Lx2-32c在10 mg/kg、20 mg/kg及30 mg/kg剂量的肿瘤抑制率分别为9%、60%、61%。表明Lx2-32c具有抑制RM-1在C57BL/6小鼠体内增殖的能力。6、在人前列腺癌细胞LNCaP及PC3的Babl/c裸鼠异体移植瘤模型中，Docetaxel在10 mg/kg剂量对两种模型的肿瘤抑制率分别为94%和90%；Lx2-32c在10 mg/kg及20 mg/kg剂量对两种模型的肿瘤抑制率分别为89%、98%和88%、90%。表明Lx2-32c具有抑制LNCaP、PC3在Babl/c裸鼠体内增殖的能力。7、MTT结果显示：下调LNCaP细胞内ATF3蛋白的表达对Lx2-32c细胞毒性无显著影响。表明ATF3在Lx2-32c抗增殖作用中并不发挥主要作用。 结论：1、Lx2-32c在体外、体内对前列腺癌细胞均显示出较强的增殖抑制活性，相同实验条件下与Docetaxel相比，体外活性更强、体内活性相当。2、Lx2-32c的抗肿瘤作用与它促进细胞内微管聚集，进而诱导细胞阻滞于G2/M期并诱导细胞凋亡有关。 研究创新点：本研究首次明确了Lx2-32c对前列腺癌具有增殖抑制活性，并阐明了Lx2-32c发挥抑制肿瘤的作用机制。