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目的:观察萆薢渗湿汤对动物模型小鼠的治疗作用,评价其治疗急性湿疹的疗效并探讨其作用机理。
方法:实验一对致敏小鼠血浆CGRP含量的影响
实验前1天将小鼠50只腹部去毛,范围约3cm×3cm。用DNCB和丙酮配成5%和1%两种溶液,开始日(第0天)和第1天于去毛部涂5%DNCB丙酮溶液25μL致敏。第7日于右耳背涂1%DNCB丙酮溶液20μL诱发皮炎。
将上述小鼠随机分成5组,每组10只,设A组(生理盐水对照组)、B组(萆薢渗湿汤高剂量组)、C组(萆薢渗湿汤中剂量组)、D组(萆薢渗湿汤低剂量组)、E组(湿毒清阳性对照组)。第0、1、2、3、4、5、6日及第7日诱发前2h和诱发后6h,按文献方法[72],萆薢渗湿汤高、中、低剂量组,用量分别为77.44g/Kg.d、38.72g/Kg.d、19.36g/Kg.d,湿毒清阳性对照组0.68g/kg.d,模型对照组给予等容积生理盐水。各组均以0.2ml/10g体重灌胃给药。
(1)血浆CGRP剂量:诱发后24小时先以肉眼观察皮损变化,除3个复方组和2个对照组外,另取10只小鼠不用DNCB诱发皮炎,仅用生理盐水作为正常对照。取血,分离血浆,按照放免法测定CGRP的剂量。
(2)真皮炎细胞计数:以打孔器取耳中部组织块,在光镜下观察耳组织学病理改变,并计算左、右耳组织切片真皮内单一核和多形核白细胞数目的差值。
实验二对醋酸所致小鼠腹腔毛细血管通透性增高的影响
取小鼠50只,随机分5组,每组10只,分组同实验一。各组均以0.2ml/10g体重灌胃给药,每天1次,连续7天。按上述给药方法于末次给药(第七天)120min后,腹腔注射0.6%醋酸溶液(每只0.2ml),同时,尾静脉注射0.5%伊文思蓝溶液(每只0.2ml),30min后脱颈处死,用10ml生理盐水冲洗腹腔,3000r/min离心15min,取上清液于590nm比色测定吸光度(OD值)。
结果:实验一:(1)血浆CGRP剂量:模型组的CGRP含量与空白组CGRP含量比较,差异有显著性(P<0.01),提示小鼠发生过敏反应,造模成功;各组药物与模型组比较对CGRP都有不同程度的上调;萆薢渗湿汤大、中剂量组有显著的差异(P<0.01),萆薢渗湿汤小剂量组作用不明显(P>0.05);大剂量组与湿毒清组比较差异无显著性(P>0.05),提示萆薢渗湿汤对致敏小鼠血浆CGRP含量的上调作用与湿毒清相似。(2)真皮炎细胞计数:大、中、小剂量组、湿毒清组可明显减少炎细胞数目,与造模组比较有极显著性差异(P<0.01);大、中剂量组、湿毒清组与小剂量组相比有显著性差异(P<0.05)。大剂量组与湿毒清无显著性差异(P>0.05)。提示萆薢渗湿汤抑制致敏小鼠炎细胞浸润的作用与湿毒清相似。
实验二:各组OD值与空白组0D值比较,均有显著性差异(P<0.05);大剂量组与湿毒清组比较差异无显著性(P>0.05),提示萆薢渗湿汤大、中、小剂量组对醋酸致小鼠腹腔毛细血管通透性增高均有抑制作用,并且其作用与湿毒清相似。
结论:萆薢渗湿汤具有良好的通过上调血浆中CGRP的含量从而抑制Ⅳ型变态反应以及降低毛细血管通透性的抗炎作用。