精索静脉曲张（varicocele,VC）是指由于血液返流引起精索内静脉和睾丸蔓状静脉丛扩张和迂曲,导致睾丸生精功能异常从而引发男性不育的一种男科常见疾病。精索静脉曲张在青少年中的发病率为15%左右。在所有不育人群中,精索静脉曲张的患者占比为35-40%,是导致男性不育最常见的疾病之一。大黄素是传统中药大黄的有效成分,具有抗肿瘤、抗炎症、抗病毒细菌感染、抗氧化应激、免疫抑制等多方面的作用。在胰腺炎、肾小球肾炎、肝炎、哮喘、动脉粥样硬化和各类肿瘤的治疗上具有临床应用价值。然而目前关于大黄素治疗精索静脉曲张的研究十分有限。本研究分为动物实验和细胞实验两个部分,分别通过构建动物模型和细胞模型,探索大黄素对睾丸生精上皮细胞的保护作用及其作用机制,从而为精索静脉曲张引起的男性不育症的治疗提供新的思路。第一部分:大黄素对精索静脉曲张致大鼠睾丸生精细胞凋亡的影响目的:探索大黄素对精索静脉曲张致大鼠睾丸生精细胞凋亡的影响。方法:随机将40只成年雄性Sprague Dawley大鼠分成4组,每组10只,分组如下:对照组（A组）、对照+大黄素组（B组）、模型组（C组）、模型+大黄素组（D组）。A组和B组为假手术组,仅打开大鼠腹腔,不做其他特殊处理。C组和D组为精索静脉曲张手术造模组,行左侧肾静脉缩窄术构建大鼠左侧精索静脉曲张模型。B组和D组大鼠在手术后开始每日固定时间点腹腔注射大黄素20mg/（kg·d）,A组和C组注射等量生理盐水。在手术后第60天对所有大鼠进行取材,从而获得睾丸组织样本。通过HE染色观察睾丸生精小管和生精上皮细胞病理形态学变化。通过TUNEL染色观察生精上皮细胞凋亡情况。采用蛋白质印迹法（Western blot）和实时定量反转录聚合酶链式反应（RT-q PCR）检测睾丸组织Bax和Caspase-3的蛋白和RNA表达水平,通过测定MDA含量和SOD活力评估大鼠睾丸组织氧化应激水平。结果:HE染色可见A组和B组为睾丸组织正常病理形态,C组较A组睾丸生精小管结构紊乱,生精细胞数量减少,而D组生精小管和生精上皮细胞病理变化与C组相比破环程度较低。TUNEL染色可见A组和B组生精细胞凋亡数量较少,C组与A组相比凋亡细胞数量显著增加,而D组与C组相比,凋亡细胞数目减少。Western blot和RT-q PCR结果显示C组Bax和Caspase-3的表达水平明显高于A组,而D组Bax和Caspase-3的表达水平低于C组。C组MDA含量高于A组且SOD活力低于A组,D组与C组相比,MDA含量低于C组且SOD活力高于C组。结论:精索静脉曲张导致大鼠睾丸生精小管结构紊乱、生精细胞数量减少、促凋亡蛋白表达量增加、凋亡细胞数量增加、氧化应激加剧。使用大黄素治疗精索静脉曲张大鼠可以抑制生精上皮细胞凋亡、降低促凋亡相关蛋白的表达、降低氧化应激水平,减少对生精小管的结构破坏和对生精细胞的损伤从而保护睾丸正常生精功能。第二部分:大黄素对缺氧致精原细胞凋亡的影响目的:探索大黄素对缺氧致精原细胞凋亡的影响。方法:选用精原细胞系GC-1进行实验,实验细胞分为4组:对照组（A组）、对照+大黄素组（B组）、模型组（C组）、模型+大黄素组（D组）。C组和D组向培养基中加入氯化钴至终质量浓度为100μmol/l以诱导细胞缺氧,继续培养细胞24h构建细胞缺氧模型,A组和B组为对照组,培养基中不加入氯化钴。24h后行细胞换液,B组和D组向培养基中加入大黄素至终质量浓度为40μmol/l,A组和C组不加大黄素,继续培养24h,收集细胞行后续实验。采用CCK-8法检测细胞存活率,采用流式细胞法测定精原细胞凋亡水平,采用Western blot和RT-q PCR分别检测精原细胞Bax和Caspase-3的蛋白和RNA表达水平。结果:CCK-8细胞活性实验示C组和D组细胞存活率均低于A组,但D组细胞存活率高于C组。流式细胞实验显示C组细胞凋亡比例高于A组,而D组细胞凋亡比例低于C组。Western blot和RT-q PCR显示C组Bax和Caspase-3的蛋白和RNA表达水平均明显高于A组,而D组Bax和Caspase-3的表达水平低于C组。结论:大黄素对缺氧模型中的精原细胞起保护作用。大黄素降低精原细胞促凋亡蛋白的表达、抑制细胞整体凋亡水平,从而提高细胞存活率。