诺帝—褐藻酸钠微球治疗兔VX2肝癌的实验研究

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目的:探讨携带诺帝的褐藻酸钠微球(kelpmierogelation,KMG)即诺帝-KMG对兔VX2肝癌疗效的影响。方法:选择50只健康新西兰大白兔,采用开腹直接种植法制作VX2肝癌模型。1.介入治疗:2周后行上腹部增强CT扫描,确定肝癌模型建立成功后,将50只实验兔随机平均分为五组行介入治疗:生理盐水组(灌注生理盐水1ml/kg)、TACE组(灌注KMG 1mg/kg+5-Fu 1mg/kg)、KMG组(灌注KMG 1mg/kg)、诺帝组(灌注诺帝1mg/kg)、诺帝-KMG组(灌注诺帝-KMG 1mg/kg)。2.治疗后观察:术后观察实验兔的一般情况;术前1d及术后1d、3d、7d检测血清谷丙转氨酶(ALT)、谷草转氨酶(AST)及肌酐(Cr)水平的动态变化;术前1d及术后7d、14d分别行上腹部增强CT扫描,观察兔VX2肝癌的CT表现,测量肿瘤最大直径和最小直径,计算肿瘤体积增长率,观察各组瘤灶的血供、坏死及转移情况,计算各组转移率;术后14d处死实验兔,选取肿瘤非坏死区及邻近肝组织用4%甲醛固定、包埋、切片,行HE染色观察肝癌术后镜下表现,行免疫组化染色观察肝癌术后血管内皮生长因子(vascular endothelial growth factor,VEGF)的表达及肿瘤微血管密度(microvessel density,MVD)的生成。结果:1.一般情况5组实验兔术后均有不同程度的精神萎靡、反应迟钝、活动减低、纳差等表现,尤以TACE组、KMG组和诺帝-KMG组明显。2.肝肾功能TACE组、KMG组和诺帝-KMG组术后1d、3d血清ALT、AST显著升高,组间无明显差异(P>0.05),但是与生理盐水组、诺帝组相比有显著性差异(P=0.00),7d后基本降至术前水平;各组血清Cr变化不大,相互间无统计学差异(P>0.05)。3.影像学表现兔VX2肝癌在CT平扫上表现为类圆形低密度影,增强扫描时呈环状强化,中心呈低密度;介入治疗前DSA动脉期表现为肿瘤血管增多、增粗、迂曲,部分呈典型“抱球样”改变,实质期可见肿瘤呈“结节样”染色,栓塞后大部分肿瘤染色减退;术后14d肿瘤体积增长率TACE组(131.82±47.90%)、KMG组(176.76±36.94%)和诺帝-KMG组(118.10±31.64%)均小于生理盐水组(460.94±112.14%)、诺帝组(388.00±98.83%),差异具有统计学意义(P<0.05);术后14d肿瘤转移率TACE组(29.6%)、KMG组(40%)和诺帝-KMG组(22.2%)均小于生理盐水组(88.9%)、诺帝组(80.0%)。4.病理学表现HE染色镜下可见肿瘤细胞核增大、异型明显、排列紊乱,瘤组织中央大片变性、坏死、结构不清;免疫组化显示各组VEGF蛋白水平各有差异,阳性率分别为:70%、70%、80%、60%及50%,MVD分别为55.45±6.16、63.17±6.42、64.59±7.68、54.53±6.23及44.67±8.22;VEGF在诺帝-KMG组阳性表达细胞中占总细胞比率最低,KMG组阳性表达率最高;诺帝-KMG组MVD最低,与TACE组、KMG组相比,差异有统计学意义(P=0.00),生理盐水组与诺帝组MVD相比,差异无统计学意义(P=0.16),TACE组与KMG组MVD相比,差异无统计学意义(P=0.72)。结论:1.诺帝-KMG是一种安全有效、毒副作用低的载药微球,在抗肿瘤治疗中具有广阔应用前景;2.诺帝-KMG能明显抑制肿瘤生长,降低肿瘤复发、转移率;3.诺帝-KMG能明显抑制肿瘤的血管生成。
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