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梨树在长期的无性繁殖过程中，感染并积累了多种病毒。分布较广泛的有梨环纹花叶病毒、梨脉黄病毒、苹果茎沟病毒，榲桲矮化病毒等。梨树一旦被病毒侵染，将终生带毒，持久受害，树势衰弱，严重影响梨果的产量和质量。茎尖离体培养可以获得无病毒苗。本试验以砀山酥梨带病毒植株为试材，采用了四种不同的茎尖脱病毒方法进行处理，经检测，获得了脱病毒试管苗。同时还系统研究了砀山酥梨脱病毒试管苗快速繁殖体系的相关技术环节，并对继代培养脱病毒苗的遗传稳定性作了深入探讨。 通过分析比较不同接种时期和不同接种外植体的污染率，褐化率及成活率，选定病毒含量少的春季旺盛生长的梢尖为茎尖脱病毒离体培养的外植体。并采取不同防褐变措施将春梢茎尖褐变率降低到5.7％。 采用正交优化设计和单因素试验相结合，筛选出茎尖分化最佳培养基配方：改良MS+2.0mg.L-1BA+0.5mg.L-1NAA+0.5％AC。初代培养，以无机盐浓度全量的MS为基本培养基，试管苗的生长状况最好。试管苗继代增殖阶段，BA浓度在0～2.0mg.L-1范围内，随外源BA浓度增加，内源ZR含量上升，芽有效增殖系数增大。在评价芽增殖效果时，内源IAA／ZR值比内源ZR绝对量能更好说明问题。在适量浓度范围内，随培养基中添加外源激素NAA、GA3浓度的增加能使相应的内源激素IAA、GA1+3含量升高，从而促进试管苗的生长。通过4代继代苗的培养，总结出砀山酥梨脱病毒试管苗最佳继代间隔时间为45d。理论上，1个梨芽1年可繁殖4.06×106株试管苗。 试管苗生根阶段，通过正交优化设计，分析出各因素对瓶内直接生根率的影响程度大小依次为：间苯三酚＞IBA＞NAA＞基本培养基。采用瓶内双步生根法，试管苗的综合生根效应都优于直接培养生根，生根率高达87.5％。梨试管苗的瓶外生根率较低，但研究其生根规律对于试管苗的扩大繁殖，降低生产实际成本有极重要的应用价值。试管苗出瓶移栽，需先驯化、炼苗。 试验选用酶联免疫吸附法和草本指示植物鉴定法，快速检测田间对照株和脱病毒试管苗的带病毒情况。经分析比较，初步判断砀山酥梨不带烟草花叶病毒，带有苹果茎沟病毒和其它病毒。 试验采用了一次取尖，二次取尖以及试管苗恒温热处理、变温热处理后再取尖培养的四种脱病毒方法。经酶联免疫吸附法检测，四种脱病毒方法对于苹果茎沟病毒的脱除率分别为25.6％，44.4％，42.8％，62.5％，其中试管苗变温热处理后再取尖培养的方法脱病毒效果最好。 通过分析杨山酥梨脱病毒试管苗的过氧化物同工酶、酯酶同工酶的酶谱，发现与田间对照株相比，未发生酶带的缺失或增添。电泳结果表明，肠山酥梨茎尖脱病毒试管苗在遗传上有相对的稳定性。