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鼻内镜手术治疗鼻腔、鼻窦疾病目前在国内外已得到广泛开展。鼻内镜手术较之传统的手术方式具有视角宽阔、视野清晰、操作精细、手术程序简化以及创伤小和免除颅鼻面部切口等优点。虽然多数患者通过手术,鼻腔、鼻窦的原发疾病得到治愈,但术后围手术期过长以及少数患者术后出现术腔粘连闭塞和继发鼻窦炎等并发症。目前,多认为这些并发症与手术操作不当、中鼻甲有病变或解剖变异、感染性病变以及病变程度严重等有关,忽视了鼻内镜术中光和热对鼻粘膜的影响,我们通过动物实验,取不同光照时间的兔的鼻中隔粘膜制作扫描电镜和透射电镜标本,对此进行了观察。通过实验研究,我们认为这些并发症与鼻内镜术中的光和热也有关,是一种复合性损伤所致。我们观察到在A组(正常对照组,未照射)纤毛分布密度及纤毛粗细均匀一致,高矮长度无明显差别,并可见微绒毛结构及典型的“9+2型”。同时可见上皮细胞内线粒体丰富,细长致密,嵴长排列整齐,基质明显。杯状细胞内粘液分泌颗粒密集。B组(连续照射30min组)纤毛分布不均,有粘连及脱落,可见纤毛的出芽生长。C组(连续照射60min组)纤毛分布稀疏,粗细不等,胞内线粒体凝缩,上皮细胞核曲边,染色质呈块状分布、边集,细胞核接近细胞表面,且可见杯状细胞脱落。D组(间歇6次,每次照射10min组)上皮细胞间距增大,纤毛局部粘连脱落,可见出芽生长,胞内线粒体肿胀,基质空泡<WP=62>化。E组(间歇3次,每次照射20min组)纤毛排列紊乱,失方向性,局部粘连脱落,粗细不均,胞内线粒体明显肿胀,嵴消失,基质空泡化。本实验中由于短时强光照射,故在上述各组未见粘膜内大量杯状细胞增生,纤毛细胞减少,纤维血管增生等粘膜慢性炎症改变,可见,本实验光和热所致的粘膜损害与鼻腔、鼻窦慢性炎症不同。同时,我们观察到在粘膜损害早期出现纤毛出芽生长这一现象,其具体机制不清,有待进一步实验研究。以往对呼吸粘膜的损伤皆注重于机械性、生物性的研究,但在光和热损伤后的修复、再生等方面尚有许多问题有待阐明。虽然目前对于鼻粘膜机械损伤后创伤修复的机制进行了深入的研究,一些研究提供了某些方面的证据,但有关光和热对鼻粘膜损伤的研究尚未见报导,由于VEGF、EGF和FGF在鼻粘膜整个机械创伤修复过程中具有的重要作用,为此我们对鼻粘膜光和热损伤后早期的VEGF、EGF和FGF等生长因子的表达及病理改变进行了研究,以便于今后更深入的研究光和热对鼻粘膜的损伤及其修复。取光照后的大鼠鼻中隔粘膜,通过免疫组织化学染色观察VEGF、EGF和FGF的蛋白表达,HE染色观察粘膜病理改变。鼻内镜术中光和热的作用可以认为是对鼻腔粘膜组织的一种创伤,这种创伤可以引起相应组织内与创伤修复有关的因子改变。本实验应用特异性抗体采用免疫组织化学法对鼻粘膜中内源性VEGF、EGF、FGF蛋白质表达进行观察,结果表明,免疫组织化学染色所有染片背景染色清晰,阴性对照不着色。FGF、VEGF、EGF蛋白表达的阳性细胞胞浆可见棕黄色反应产物。未经光照的大鼠鼻粘膜VEGF、EGF和FGF主要表达在上皮和血管内皮;随着照射<WP=63>及其时间延长,上述三种因子蛋白在粘膜上皮和血管内皮表达明显增强。同时在炎细胞和腺体内亦有表达。HE染色切片细胞核被苏木素染成蓝色,软骨基质,钙盐颗粒均呈深蓝色,细胞桨被伊红染成程度不同的粉红色,红细胞呈桔红色。未经光照的大鼠鼻粘膜结构完整,呈连续性;无明显的病理改变,光照后且随照射时间延长,大鼠鼻粘膜上皮增生、变厚,有的破裂,呈不连续性,血管扩张,粘膜下出现炎细胞浸润。测定免疫组化染色标本中细胞阳性产物的平均吸光度值,并进行t检验统计处理,发现照射15min组和照射30min组的VEGF、EGF、FGF测定值与未照射组的测定值分别比较,t检验均有显著性差异(p<0.05),照射15min组的VEGF、EGF、FGF测定值与照射30min的测定值分别比较,t检验结果无显著性差异(p>0.05)。本实验光照粘膜损伤后,VEGF在血管内皮细胞中表达明显增强,说明光损伤作用在未引起组织坏死的情况下可以因VEGF的表达增强,进而使受损组织的纤维血管出现增生改变,使组织损伤得到修复。但由于本实验观察时间短,此观点需进一步研究证实,以及其与慢性炎症的血管增生有何区别也需深入观察。另外,光照后在粘膜上皮和血管内皮细胞中VEGF表达明显增强,作者认为主要是由于光照后局部组织内缺氧所诱导发生的内源性VEGF短时间内快速释放的结果。EGF和FGF在光照后粘膜上皮及血管内皮细胞中表达也明显增强,说明鼻粘膜光照损伤后其早期粘膜的修复机制即已启动,内源性EGF和FGF在此种创伤修复中具有重要作用。综上所述,鼻内窥镜术中光和热对鼻粘膜具有损害作用,且连续照射时间越长,这种损害也越重,当出现细胞坏死时,就可<WP=64>能出现术后并发症,这提示我们在鼻内镜手术中应尽量缩短手术时间,尤其是连续照射时间。VEGF、EGF、FGF三种因子与鼻粘膜光照后的创伤修复密切相关,并且随着光照时间延长,其在粘膜上皮及血管内皮细胞的表达有增强趋势,在此过程中发挥其重要的生理作用。正是由于VEGF、EGF、FGF具有的多种生理作用,因此测定?