ACE2-Ang(1-7)-MasR轴在大鼠心肺复苏后早期脑损伤中的作用研究

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目的:探讨ACE2-Ang(1-7)-Mas R轴在大鼠心搏骤停-心肺复苏(cardiac arrestcardiopulmonary resuscitation,CA-CPR)后早期脑损伤中的作用,为心肺复苏后脑损伤临床治疗提供新思路。方法:用室颤法(ventricular fibrillation,VF)制作CA-CPR模型,54只大鼠随机分为假手术组(sham,n=18)、常规复苏组(control,n=18)、Mas R激动剂Ang(1-7)组(n=18)。留取大鼠复苏后2h、4h、6h脑组织及血清标本。用比色法检测脑组织NO、O2-表达,ELISA法检测血清AngⅡ、ACE、ACE2、Ang(1-7)、S100B及脑组织3-NT的表达,Western Blot法检测脑组织AT1R、AT2R、i NOS、e NOS及Mas R蛋白的表达情况,HE染色法检测脑海马回组织病理情况。结果:1.CA-CPR后RAS系统、氧化应激、硝化应激及脑损伤变化:与sham组比较,control组CPR后2h、4h、6h Ang II、Ang(1-7)、ACE、ACE2、AT1R和AT2Rm RNA、AT1R、AT2R和Mas R蛋白表达、NO、3-NT、O2-、iNOS和e NOSm RNA、e NOS和i NOS蛋白表达、S100B表达均明显升高,CPR后4h、6h Mas Rm RNA表达水平升高,差异有统计学意义(P<0.05);Ang(1-7)组CPR后2h、4h、6h ACE、ACE2、AT1R和AT2R蛋白表达、Mas Rm RNA和Mas R蛋白表达、O2-、NO、e NOSm RNA和e NOS蛋白表达、S100B表达均升高,CPR后4h、6h AT1R和AT2Rm RNA表达升高,CPR后6h脑组织中3-NT和i NOS蛋白表达稍升高,差异有统计学意义(P<0.05)。2.给予Mas R激动剂Ang(1-7)对CACPR后RAS系统、氧化应激、硝化应激及脑损伤的影响:与control组比较,Ang(1-7)组CPR后2h、4h、6h ACE、ACE2、AT1R和AT2Rm RNA、AT1R和AT2R蛋白表达、3-NT、O2-、i NOSm RNA和i NOS蛋白表达、S100B浓度均降低,CPR后2h e NOS蛋白表达稍降低,CPR后2h、4h、6h Mas Rm RNA和Mas R蛋白表达、NO、e NOSm RNA表达均升高,CPR后4h、6h e NOS蛋白表达升高,差异有统计学意义(P<0.05)。3.CA-CPR后及给予Mas R激动剂Ang(1-7)对海马回组织病理变化的影响:与Sham组比较:control组与Ang(1-7)组CPR后6h海马回组织病理均出现了神经细胞稀疏,排列不规则,细胞核固缩深染、细胞排列不整齐,间质水肿等改变;与control组比较:Ang(1-7)组CPR后6h海马回组织细胞间质水肿稍减轻,细胞核固缩深染的数量减少。结论:1.CA-CPR后早期脑组织氧化应激和硝化应激反应被过度激活;2.CA-CPR后早期促进ACE2-Ang(1-7)-Mas R轴的激活通过上调e NOS表达,下调O2-、i NOS的表达,降低氧化应激和硝化应激反应水平,稍减轻脑组织病理损伤。
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