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背景:如何以高质量及较快的速度来治疗各种急慢性创面,依然是当代医学面临的一个严峻的问题。创面修复是一个由大量细胞,细胞因子以及各种细胞外基质成分等多组分协调配合,共同作用的复杂而有序的生理过程。作为创面修复过程中的重要参与者,应用细胞因子往往能够在非常小的剂量就发挥非常明显的效果,因此,细胞因子无疑是一种治疗创伤和促进创面修复的理想的具备生物活性的药物。然而,在应用细胞因子作为治疗药物应用于人体时,在机体微环境内极短的半衰期(多数仅数分钟)导致了必须加大投药量和投药次数来维持其作用从而使治疗成本大大提升。近年来,各种各样的药物控释体系越来越多的被研究并应用在各种疾病的治疗之中。聚合物微球便是其中较为热门的一种载药体系。由于具有成本低廉,可塑性好,并且具有良好的生物相容性和生物可降解性,使得他们成为了非常理想的制备生物和组织工程材料的原料。已经有许多研究成功的制备了高分子聚合物为基质的载药微球,这些微球均被证明有良好的生物相容性,并且对封装载微球内的药物都有保护和缓慢控释的作用。碱性成纤维细胞生长因子(Basic Fibroblast Growth Factor,bFGF)是创面修复过程中一个重要的有丝分裂原,能对创面修复过程中的多种细胞产生调控作用,在体内主要发挥的作用有:1)促进创伤愈合和组织修复;2)作为血管生长因子促进新生血管形成;3)促进组织再生。然而,作为细胞因子,其具有细胞因子普遍具有的缺点,即在体内半衰期极短。因此,将其封装于缓释微球中作为控释药物系统来达到控制释放和延长作用的目的。创面修复最常见的并发症为慢性创面,而导致慢性创面最为常见的原因之一就是感染。因此,作为促进创面修复的生物材料,如果同时具备促进组织修复和抗感染,则能够在促进组织修复的同时起到预防和治疗感染的作用,将使得该材料能够具有更为广泛的应用范围,以及获得更好质量的促进组织修复的作用。纳米银(Silver Nanoparticle,AgNP)作为一种广谱抗菌剂,在本研究中同bFGF一起封装于聚合物微球内,共同于创面修复过程中发挥作用。目的:本研究通过同轴电喷技术成功制备了共载纳米银和bFGF的PLGA/PCL壳核结构药物控释微球,并通过表征其理化性质及药物释放规律等,确定出用于制备促进创面修复的微球的最佳参数,并对载药微球的生物学效用进行体内和体外的评价。方法:1、在不同参数条件下应用同轴电纺技术制备bFGF壳核结构的PLGA微球,并通过扫描电子显微镜(Scanning Electron Microscope,SEM)、透射电子显微镜(Transmission Electron Microscope,TEM)等对其结构进行表征,并对其药物释放规律进行探究。2、在前期实验基础上对微球制备条件进行改进,改善bFGF的释放规律,并加入了纳米银颗粒,制备得到共载纳米银及bFGF的PLGA/PCL壳核结构微球,并对其各种性质进行表征。3、通过共载纳米银及bFGF的PLGA/PCL壳核结构微球与人成纤维细胞共培养,应用划痕实验,免疫荧光和免疫印迹(western blot)等实验对微球进行体外评价。4、建立大鼠背部全层皮肤缺损模型,并应用共载纳米银及bFGF的PLGA/PCL壳核结构微球于创面,通过大体观察,HE染色,Masson染色,免疫组织化学染色以及western blot实验对微球进行体内评价。结果:1、通过SEM观察得出,在一定范围内,升高电压,降低壳层聚合物溶液的浓度有助于降低微球的尺寸,并且可以使微球的粒径分布更加均一。通过TEM的观察分析,确定了微球的壳核结构。此外,还通过包封率和药物缓释曲线,确定了药物释放与粒径的关系。2、在前期实验的基础上应用同轴电喷技术成功制备了共载纳米银及bFGF的PLGA/PCL壳核结构微球。同时对微球进行了初步的体外评价,一方面,通过金黄色葡萄球菌抗菌实验,对共载纳米银及bFGF的PLGA/PCL壳核结构微球的抗菌性能进行了验证,并且,通过CCK-8检测了微球中不同组分对于细胞增殖的影响,确定了微球无细胞毒性,具有良好的生物相容性,同时载bFGF的微球有较好的促进细胞增殖的作用。3、首先是划痕实验证明了单纯载bFGF的微球和共载纳米银及bFGF的微球对于体外培养的成纤维细胞均有明显的促进其迁移能力的作用;另一方面,通过免疫细胞化学荧光和免疫印迹实验,从不同角度证明了单纯载bFGF的微球和共载纳米银及bFGF的微球对于体外培养的成纤维细胞均有明显的促进其增殖的作用。4、通过将微球应用于大鼠背部全层皮肤缺损模型,从大体观察,组织学评价和western blot等多个角度证明了共载纳米银及bFGF的PLGA/PCL壳核结构微球具有良好的促进创面修复的功能。结论:通过同轴电喷技术,可以成功制备共载纳米银及bFGF的PLGA/PCL壳核结构微球,且该微球具有良好的药物缓释规律,具有良好的生物相容性,同时具备良好的抗菌性能和并能够从多方面促进创面的愈合。