论文部分内容阅读
甲状腺癌是近年来发病率增长最快的恶性肿瘤之一,其中约98%为分化型甲状腺癌(Differentiated Thyroid Cancer,DTC)。虽然DTC的死亡率较低,但复发率高达20%-40%,因此针对甲状腺癌的早期诊断以及术后患者的随访十分重要。血清甲状腺球蛋白(Tg)测定是公认的监测DTC复发的敏感方法,10-25%的DTC病人由于有Tg自身抗体(Tg Ab)的存在,干扰了Tg的免疫学检测,影响了对DTC患者复发的正确判断。测定外周血中Tg mRNA的表达,可消除Tg Ab的不利影响,获得准确的信息,但学术界对其在临床上的应用,仍存在争议。本研究的第一部分,探讨了从少量全血标本中标准化获取高质量总RNA的方法,研究了标本保存条件对总RNA提取效率的影响。对179例保存在不同温度和时间的血标本以及20例冻融次数不同的血标本进行了总RNA的提取、定量和定性分析,证实新鲜血的总RNA浓度最高,超低温保存全血更为适宜,冻融次数的增加会导致RNA完整性下降。本研究所确立的总RNA提取条件稳定、可靠、实用。本研究的第二部分利用实时定量Real-Time PCR技术对308例全血标本和23例甲状腺病变组织中的Tg mRNA进行了相对定量分析,结合血清Tg、Tg Ab结果,深入探讨了Tg mRNA在不同甲状腺疾病中的表达差异。结果显示,甲状腺病变组织和病变旁组织Tg mRNA的表达无显著差异,p=0.540。甲状腺癌患者血液中的Tg mRNA表达量最高,与对照组、结节性甲状腺肿组和甲状腺功能亢进组间差异显著,p值分别为:0.0005、0.0002、0.0027。回归分析发现血清Tg和Tg Ab与血液中Tg mRNA的表达水平呈正相关。而DTC分期情况与血液Tg mRNA表达水平关系不大。本研究证明:Tg mRNA的检测,在DTC的临床诊断中帮助不大,而在其术后的随访中非常有意义,尤其是针对Tg Ab阳性的患者,Tg mRNA的检出率和表达量能够提示并弥补免疫学检测Tg的不足,通过对外周血Tg mRNA的定量检测,结合血清Tg, TgAb结果以及其它用于DTC患者随访的检测手段,对于判断DTC患者术后是否复发,提高患者的生存率和生活质量有积极意义。