【摘 要】
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银杏叶提取物是世界上最珍贵的天然植物药提取物之一,具有促进血液循环、消除充血、降浊降脂、镇静、止痛、抗氧化等功能。目前,国内外关于银杏叶提取物以及其他制剂的研究主要集中在银杏叶中黄酮、黄花素、内酯和银杏酸等物质的含量,但对糖类化合物等银杏叶中其他成分的研究较少,其质量控制缺乏全面性和准确性。有研究表明,中草药的药理活性与其糖含量密切相关。由于糖类具有多种生物活性(抗癌、抗炎等)已成为近年的研究热点
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银杏叶提取物是世界上最珍贵的天然植物药提取物之一,具有促进血液循环、消除充血、降浊降脂、镇静、止痛、抗氧化等功能。目前,国内外关于银杏叶提取物以及其他制剂的研究主要集中在银杏叶中黄酮、黄花素、内酯和银杏酸等物质的含量,但对糖类化合物等银杏叶中其他成分的研究较少,其质量控制缺乏全面性和准确性。有研究表明,中草药的药理活性与其糖含量密切相关。由于糖类具有多种生物活性(抗癌、抗炎等)已成为近年的研究热点。因此,银杏叶中糖的分析对于探索这一珍贵植物资源的结构鉴定、构效关系及综合利用具有重要意义。本文分别采用液相色谱、离子色谱和高效毛细管电泳技术对银杏叶中游离的木糖、葡萄糖、甘露糖、岩藻糖、鼠李糖和半乳糖进行测定,为银杏叶中糖类化合物的测定提供了数据和方法支撑。本文首先采用高效液相色谱法示差折光检测器,在NH2P-50色谱柱上优化了流速和流动相比例。在流动相为乙腈和水的条件下,流动相为乙腈-水(70:30),柱温为30℃,流速为1.0 mL·min-1条件下分离效果最好,可以分离鼠李糖、木糖、甘露糖和半乳糖。但仍然无法实现鼠李糖与岩藻糖、半乳糖与葡萄糖的基线分离,因此需要采用新的检测手段达到分离单糖的目的。然后应用离子色谱电化学安培检测器,在无需衍生化的条件下,在Carbo Pac PA20阴离子交换色谱柱上通过优化Na OH淋洗液浓度分离条件,最终确定在12.5mmol·L-1的Na OH淋洗液梯度洗脱的条件下,实现了单糖的分析测定,银杏叶中单糖的回收率均在83.40%~116.30%之间。其次利用高效毛细管区带电泳技术和紫外检测器,通过单因素实验研究了分离六种单糖的衍生剂萃取次数、缓冲液浓度及pH值等因素对于分离实验的影响,得到了最优工艺条件为:萃取次数3、硼酸缓冲液浓度为30 mmol·L-1、pH=9.5条六种单糖RSD均小于5%,应用于银杏叶中六种单糖的测定,回收率在80.64%~114.67%之间。另外采用一种新型胺类衍生剂——对甲氧基苯胺,利用毛细管区带电泳紫外检测同时分离了尿苷二磷酸半乳糖和尿苷二磷酸葡萄糖,并且通过单因素实验研究了最佳分离结果下的衍生化的加热时间和温度、缓冲液浓度及分离电压。该方法在缓冲液浓度为50 mmol·L-1、pH 9.0、分离电压为20 kV的条件下分离效果最好。两种单糖异构体在15 min之内实现分离,RSD小于5%。
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