论文部分内容阅读
目的1、探讨利用超小顺磁性氧化铁(USPIO)偶联唾液酸化酶x(s Lex)构建靶向内皮细胞粘附分子-1(ELAM-1)的特异性磁共振成像的分子探针的制备方式,并研究其物理化学特征。2、采取裸鼠构建鼻咽癌移植瘤模型,探究超小顺磁性氧化铁(USPIO)偶联唾液酸化酶x(sLex)构成靶向血管内皮细胞粘附分子-1(ELAM-1)的特异性磁共振成像的分子探针(USPIO-PEG-sLex)在鼻咽癌移植瘤的运用价值。方法利用物理沉积方法合成USPIO纳米颗粒,通过疏水作用,合成较好水溶性的USPIO-PEG,其表面-COOH充分活化,常温下与sLex充分孵育,超滤离心和去离子水洗涤,形成磁共振分子探针USPIO-PEG-sLex。采用透射电子显微镜(TEM)分析USPIO-PEG-sLex的形态和粒径,动态光散射(DLS)分析偶联前与偶联后USPIO-PEG-sLex的平均水动力尺寸,粒径分析仪检测偶联前后USPIO-PEG-s Lex的Zeta电位。将10只鼻咽癌裸鼠移植瘤模型随机分为实验组和对照组,分别于尾静脉注入USPIO-PEG-sLex和USPIO-PEG前后行磁共振T2 mapping成像,比较分析注射造影剂前后移植瘤的T2值变化。MRI扫描完后取移植瘤组织,应用免疫组织化学染色技术分析肿瘤组织新生血管内皮细胞上ELAM-1的表达。结果透射电镜测定USPIO-PEG平均粒径为10±2.6nm,分散性较好,大小适宜;动态光散射测定偶联前后其平均水动力尺寸分别为(34.06±9.95)nm,(53.35±16.99)nm;偶联前的PEG化磁性纳米颗粒的Zeta电位为(11.6±3.96)mV,偶联后为(-12.6±5.33)mV。USPIO-PEG-s Lex具有良好表征。对照组和实验组的鼻咽癌移植瘤的平扫T2值差异没有统计学意义(P>O.05),增强扫描后两组的T2值下降,两组的T2值差异有统计学意义(P<O.05);实验组的强化率更低,两组的强化率差异有统计学意义(P>0.05)。实验组中瘤体与肌肉的强化率差异有统计学意义(P<O.05)。免疫组化结果显示E-选择素蛋白在血管内皮细胞胞浆或胞膜呈棕黄色表达。HE染色结果显示胞核为深蓝色且具有显著异型性,胞浆及纤维组织为深浅不一的红色。结论化学交联法可成功制备磁共振分子探针USPIO-PEG-sLex,该分子探针的表征良好,有望用于体内、外实验特异性地结合ELAM-1。USPIO-PEG-s Lex纳米磁性颗粒有望作为鼻咽癌ELAM-1表达的靶向造影剂,在非创伤动态监测ELAM-1的表达方面具有良好的潜在应用前景。