BTLA在活动性肺结核患者外周血T细胞亚群中的表达及其临床意义

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B、T淋巴细胞弱化因子(B and T lymphocyte attenuator,BTLA)是2003年发现的CD28家族共抑制受体,主要表达于T、B细胞,在DC、单核细胞及NK细胞上也有表达,能负性调节T、B细胞的激活与增殖,维持树突状细胞在内环境中的稳定,抑制记忆性CD8+T细胞的分化,其在细菌感染中发挥着重要作用。但它在结核分枝杆菌感染中所发挥的免疫作用还不清楚。为了进一步研究BTLA在结核病人体内的表达情况以及与结核病发生、发展的关系,我们收集了57例活动性肺结核患者和26例健康志愿者的外周血,分离单个核细胞,流式细胞术分析BTLA在T细胞亚群中的表达情况及其临床意义,为结核病的临床诊治提供理论依据。   [目的]   检测BTLA在肺结核患者外周血T细胞亚群中的表达,结合T细胞亚群分泌IFN-γ的情况,分析BTLA的表达与结核病药物治疗、患者皮试情况、痰涂情况以及患者年龄、性别等的相关性,探讨BTLA在结核病患者T细胞亚群中表达的临床意义。   [方法]   1.按照2000年中华医学会结核病学分会制定的肺结核诊断标准收集57例活动性肺结核患者及26例健康志愿者的外周血,并根据抗结核药物(ATDs)治疗情况、皮试(TST)阳(阴)性、痰涂片(SS)阳(阴)性、年龄和性别进行实验分组。   2.采用密度梯度离心法分离外周血单个核细胞,台盼蓝检测细胞活力,并进行细胞计数。   3.加荧光标记抗体染色:PE-Cy7-CD3抗体、FITC-CD4抗体(FITC-CD8抗体)和APC-hBTLA抗体,进行细胞表型染色,并加入PE-IFN-γ抗体,进行胞内染色。   4.流式细胞术分析CD3+BTLA+T细胞、CD3+CD4+BTLA+T细胞、CD3+CD8+BTLA+细胞、CD3+IFN-γ+T细胞、CD3+CD4+IFN-γ+T细胞、CD3+CD8+IFN-γ+T细胞、CD3+CD4+BTLA+IFN-γ+T细胞和CD3+CD8+BTLA+IFN-γ+T细胞的百分率。   5.分析各群细胞与患者的年龄、性别、痰涂、药物治疗、皮试情况的相关性。   [结果]   1.结核病患者外周血中的CD3+BTLA+T细胞、CD3+IFN-γ+T细胞、CD3+CD8+BTLA+T细胞、CD3+CD8+IFN-γ+T细胞和CD3+CD4+BTLA+IFN-γ+T细胞数均低于健康对照组。   2.在结核病患者中,治疗前CD3+CD8+BTLA+T细胞数低于治疗后。   3.在结核病患者中,年轻组(17~39岁)CD3+CD8+BTLA+T细胞数低于年老组(42~65岁)。   4.在年轻组中,结核病患者外周血中的CD3+CD8+BTLA+T细胞数低于健康对照组。   5.年轻的女性PTB患者组(n=9)外周血CD3+CD8+BTLA+T细胞数低于年轻男性PTB患者组(n=25)和年轻的男性健康志愿者组(n=15)。   6.在接受抗结核药物(ATDs)治疗小于1周的PTB患者中,年轻患者组(n=24)的CD3+CD8+BTLA+T细胞数低于年老组(n=11)。   [结论]   1.首次发现结核病患者外周血中的CD3+BTLA+T细胞和CD3+CD8+BTLA+T细胞亚群均低于健康对照组,提示BTLA在肺结核发病中起一定作用,推测结核分枝杆菌通过调节BTLA的表达来逃逸机体的免疫攻击。   2.结核病患者外周血中的CD3+CD4+BTLA+IFN-γ+T细胞数低于健康对照组,提示BTLA的表达可能影响CD3+CD4+T细胞IFN-γ的分泌。   3.结核病患者外周血中CD3+CD8+BTLA+T在不同年龄、性别及是否药物治疗等方面均有明显差异,其机制有待于进一步研究。
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