芸薹属硫代葡萄糖苷相关基因的ACGM标记

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硫代葡萄糖苷是广泛存在于十字花科植物中的含硫次级代谢产物。硫代葡萄糖苷以及它们的衍生产物在植物防御、人类的营养和抗癌方面具有特殊的作用。 现在一般接受的硫代葡萄糖苷生物合成的模式主要包括3个主要阶段:(1)侧链的延长;(2)糖苷核心的合成;(3)侧链的二次修饰。目前已经在拟南芥中检测出有关这3个阶段生物合成的相关基因和酶的特性。 本实验选取芸薹属代表植物西兰花,油菜,甘蓝,大白菜为试验材料,对硫代葡萄糖苷合成核心途径中的的关键基因CYP79A2进行ACGM标记。选择芸薹属作为实验对象不仅仅因为芸薹属蔬菜中普遍含有硫苷代葡萄糖苷且含量丰富,更重要的是芸薹属蔬菜在我国广泛栽培,具有可观的经济价值。 本实验根据拟南芥中已经鉴定出的硫代葡萄糖苷结构基因CYP79A2的保守序列设计特异引物,并以选取材料总基因组DNA为模板进行PCR反应,并对PCR产物进行测序及分析。为了克服基因表达丰度低等问题,加大了DNA模板的使用量,减少了引物的使用量,适当提高退火温度,反复多次试验。 分析PCR产物在芸薹属中的分布,通过对重要代谢途径基因的比较分析探讨芸薹属各个种之间的亲缘关系,并且有可能为利用代谢工程改造芸薹属作物的硫代葡萄糖苷的代谢提供分子辅助选择手段。
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