近十几年来,荧光探针分别在生命科学及材料科学等许多领域发挥着重要的作用,已广泛应用于分子及细胞,甚至于生物活体的研究中。硫化氢（H₂S）是继NO和CO后的第三种能够在生命体内发挥生理作用的气体分子,该气体分子在各种生理和病理过程中起着重要的作用,比如,神经调节,细胞凋亡及炎症调节等。生物体内硫化氢的浓度失调时,就会引发各种疾病,比如唐氏综合症及糖尿病等疾病。因此,实选择性检测机体内H₂S在生物医学方面意义重大。本文基于荧光素染料为荧光团,在它的结构中引入氨乙基吗啉靶向溶酶体,叠氮为H₂S的响应基团和酸性环境下罗丹明的开环机理,设计并合成了一种pH依赖性、溶酶体靶向的硫化氢响应荧光探针MF-N₃。体外实验结果表明探针MF-N₃在酸性缓冲溶液中对H₂S具有高灵敏度、高选择性及快速响应的能力,在中性缓冲溶液中不响应H₂S。细胞成像实验结果表探针MF-N₃可以特异性地对溶酶体中的H₂S进行成像分析检测,是一种高灵敏度、高选择性的溶酶靶向H₂S响应有机荧光探针。NAD（P）H:hNQO1,又被称DT-硫辛酰胺脱氢酶（DT-diaphprase）,最早由Navazio和Ernster于1958年报道,是一种含有274个氨基酸的黄素蛋白酶,普遍存在于真核细胞中的。hNQO1是一种保护性的还原酶,可被环境因素强烈诱导,如多环芳烃,偶氮染料,酚类抗氧化剂缺氧等因素。hNQO1不仅可以代谢人体内的多种苯类致癌物,而且还发挥着保护细胞免受氧化损伤的作用。最近的研究表明,hNQO1在结肠癌及胰腺癌等多类肿瘤中高表达,引起了研究者们的重要关注。我们设计并合成了一种高性能的用于检测hNQO1的双光子荧光探针TP-NQO1,探针是以双光子性能优异的荧光染料Acedan为荧光团,特异性响应hNQO1的三甲基琨酸为响应团,通过酰胺键构建了一个高性能的双光子荧光探针TP-NQO1。体外数据表明探针TP-NQO1对hNQO1具有高选择性和高灵敏的响应能力。