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目的:观察外源性VEGF对自体脾组织大网膜内移植后血管再生过程及组织结构重建的影响,探讨应用外源性VEGF促进自体脾组织移植后血管再生与结构重建的可能性及其作用机制,为VEGF用于自体移植脾组织的实验研究和临床应用提供理论参考依据。方法:216只昆明种小白鼠随机分为脾切除自体脾组织大网膜内移植组及假手术组,将脾切除自体脾组织大网膜内移植后的小鼠再随机分为实验观察组(应用外源性VEGF组) 和对照组(不用外源性VEGF组) 。实验观察组小鼠分别于术后7、15、30、60 d于尾静脉内注射VEGF,注射后7、14、30、60、90 d各处死3只,取脾组织标本;对照观察组和假手术组分别于术后于上述对应时相点各处死3只,取脾组织标本,进行下列研究:(1)组织学观察 按照光镜、电镜常规要求分别制作光镜和电镜切片,在光镜和电镜下观察各组标本的组织学特征;(2) 血管面密度测定 经小鼠左心室主动脉插管右心房开窗灌洗后,同等压力下灌注墨汁混悬液,静置30 min后取脾组织制片,应用计算机图象分析系统测定血管面积密度;(3) KDR的检测 应用免疫组化染色方法,结合图象分析测定自体移植脾组织KDR阳性细胞密度;(4) KDR mRNA检测 采用组织原位杂交技术,观测自体移植脾组织中KDR mRNA的表达。结果:(1) 组织学观察 ①术后7、15、30 d注射VEGF组 注射VEGF后较对照组的血管数量明显增多,脾小体、中央动脉及其周围淋巴鞘的数量也增多,面积增大,最终形成了较完整的白髓、边缘区、红髓结构,纤维组织数量较对照组少。②术后60 d注射VEGF组 注射VEGF后与对照组各时相点的组织学特征没有明显差别。(2) 血管面密度测定 ①术后7、15、30 d注射VEGF组 墨汁灌注显示血管数量及面密度实验观察组较对照组明显增多。②术后60 d注射VEGF组 血管数量与对照组比较没有明显差别。(3) KDR的检测 ①术后7、15、30 d注射VEGF组 KDR面积密度值高于对照组。②术后60 d注射VEGF组 KDR面密度值与对照组比较无显著差别。(4) KDR mRNA检测 ①术后7、15、30 d注射 KDR mRNA表达阳性细胞密度高于对照组。②术后60 d注射VEGF组 KDR mRNA表达阳性细胞密度与对照组比较没有明显差异。 <WP=9>结论:(1) 外源性VEGF能够促进移植脾组织内血管生长,改善移植脾组织的血液循环,有利于移植脾组织再生,使其结构恢复更趋完善;(2) 自体脾组织移植术后7-15 d开始静脉应用VEGF是促进血管再生的较理想时间;(3) 外源性VEGF可能是通过与移植脾组织内所表达的KDR结合发挥作用。