【摘 要】
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该论文对影响山羊类胚胎干细胞（embryonicstemcell,ES细胞）和胚胎生殖细胞（embryonicgermcell,EG细胞）培养、分离、克隆、传代效果的影响因素进行了研究,方法一：采用昆白小鼠胚胎
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该论文对影响山羊类胚胎干细胞（embryonicstemcell,ES细胞）和胚胎生殖细胞（embryonicgermcell,EG细胞）培养、分离、克隆、传代效果的影响因素进行了研究,方法一：采用昆白小鼠胚胎成纤维细胞（MEF）或山羊胚胎成纤维细胞（GEF）作为饲养层,高糖DMEM+10﹪NBS+20ng/mlLIF+10ng/mlSCF+0.1mMβ-巯基乙醇+100IU/ml青霉素+100IU/ml链霉素作为培养基,从5-6d胚胎中分离出山羊类ES细胞,克隆传至四代,其中第一代获得类ES细胞集落30个（33.3﹪）,第二代获得类ES细胞集落8个（8.9﹪）,第三代获得类ES细胞集落3个（3.3﹪）,第四代获得类ES细胞集落2个（2.2﹪）.该实验研究了胚龄、生长因子、饲养层对山羊ES细胞分离和克隆的影响.方法二：采用45-70d山羊胎儿的生殖腺与其同源成纤维细胞共培养,高糖DMEM+7.5﹪NBS+7.5﹪FCS+20ng/mlLIF+10ng/mlSCF+0.1mMβ-巯基乙醇+100IU/ml青霉素+100IU/ml链霉素作培养基,分离出山羊原始生殖细胞（PGCs）,克隆并多次传代.45d胎儿原代观察到36个类PGCs细胞集落,传至4代后丢失.55d的胎儿获得11个PGCs集落,可传代2次,从70d胚胎的生殖腺没有分离到PGCs细胞集落.
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