【摘 要】
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[目的]研究姜黄素对人前列腺癌细胞（DU145、LNCAP）的增殖、凋亡及自噬的影响及其对IL-6/JAK2/STAT3通路表达的影响。[方法]1.使用SRB法检测不同浓度,不同时间点姜黄素对人前列腺癌细胞系（DU145、PC-3、LNCAP）增殖抑制的影响。2.使用平板克隆实验检测不同浓度姜黄素对人前列腺癌细胞系（DU145、LNCAP）克隆形成能力的影响。3.荧光显微镜观察不同时间药物作用细胞
【基金项目】
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云南省科技厅-昆明医科大学应用基础研究联合专项资金项目（201701UH00593）；
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[目的]研究姜黄素对人前列腺癌细胞（DU145、LNCAP）的增殖、凋亡及自噬的影响及其对IL-6/JAK2/STAT3通路表达的影响。[方法]1.使用SRB法检测不同浓度,不同时间点姜黄素对人前列腺癌细胞系（DU145、PC-3、LNCAP）增殖抑制的影响。2.使用平板克隆实验检测不同浓度姜黄素对人前列腺癌细胞系（DU145、LNCAP）克隆形成能力的影响。3.荧光显微镜观察不同时间药物作用细胞,镜下观察细胞生存状态并拍照。4.通过EdU染色法检测不同浓度姜黄素作用下对人前列腺癌细胞系（DU145、LNCAP）增殖的影响。5.通过蛋白免疫印迹法检测姜黄素作用对前列腺癌细胞IL-6/JAK2/STAT3通路中相关因子表达的影响。6.通过蛋白免疫印迹法检测姜黄素对前列腺癌细胞相关凋亡蛋白表达情况。7.通过蛋白免疫印迹法检测姜黄素对前列腺癌细胞相关自噬因子表达情况。8.通过蛋白免疫印迹法检测姜黄素可能通过IL-6/JAK2/STAT3通路调控前列腺癌细胞凋亡、自噬。[结果]1.SRB实验检测结果表明:姜黄素对人前列腺癌细胞系的增殖展现出明显的抑制作用,且该作用具有一定的药物浓度、时间依赖性。2.平板克隆实验结果表明:姜黄素处理组与对照组相比,细胞克隆形成能力明显减弱,增殖受到明显的抑制,具有药物浓度依赖性。3.荧光显微镜下观察拍照发现,随着姜黄素作用时间的延长,细胞形态开始缩小变圆,局部发现有细胞融合,坏死细胞崩解的现象,坏死细胞增多,表明药物对细胞的杀伤能力也加大,与SRB结果一致。4.细胞在不同浓度姜黄素作用24 h后采用EdU试剂盒检测细胞增殖情况,与对照组相比,可以发现视野中红色荧光要少于对照组,且与浓度成正比。5.蛋白免疫印迹法实验结果显示:姜黄素处理两种细胞IL-6/JAK2/STAT3通路中p-JAK2、p-STAT3的相对表达均有不同程度的减弱。6.蛋白免疫印迹法实验结果显示:药物处理前列腺癌细胞株与对照组相比,不同浓度的姜黄素处理细胞后,PARP1、Cleaved-caspase3的蛋白表达量均明显增加,Bcl-2的蛋白表达量显著减少;相同浓度的姜黄素处理不同时间后,前列腺癌细胞株中PARP1、Cleaved-caspase3的裂解片段蛋白表达量随时间均明显增加,Bcl-2的蛋白表达量随时间均显著减少。7.蛋白免疫印迹法实验结果显示:选取药物处理前列腺癌细胞株,与对照组相比,不同浓度的姜黄素处理细胞后,Beclin-1、LC3B的蛋白表达量均明显增加;相同浓度的姜黄素处理不同时间后,前列腺癌细胞株中Beclin-1、LC3B的蛋白表达量均明显增加。8.蛋白免疫印迹法实验结果显示:在姜黄素作用下PARP1、Cleaved-caspase3、Beclin-1,LC3B的蛋白表达量明显上升,Bcl-2的蛋白表达量显著减少,IL-6+Cur共同作用后其表达量有一定程度的回复,姜黄素可能通过IL-6/JAK2/STAT3通路调控前列腺癌细胞凋亡、自噬。[结论]姜黄素能够抑制前列腺癌细胞的增殖,诱导凋亡,且对前列腺癌细胞具有一定毒性;进一步研究发现,姜黄素可以通过介导IL-6/JAK2/STAT3信号通路促进前列腺癌细胞的凋亡和自噬的发生。
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