【摘 要】
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目的:本文以新疆哈萨克羔羊为研究动物,通过研究芽孢杆菌对正常羔羊及感染大肠杆菌的羔羊肠胶质细胞分泌因子IL-1β、IL-6和GFAP的表达及肠道发育的影响。为探讨芽孢杆菌对羔羊EGCs分布以及对感染大肠杆菌羔羊EGCs分泌因子的影响提供参考。方法:本试验的研究动物为28只健康的3月龄新疆哈萨克羔羊,随机分为4组,空白对照组:羔羊喂食基础日粮,同时进行生理盐水灌服干预;芽孢杆菌处理组（BH）:羔羊口
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目的:本文以新疆哈萨克羔羊为研究动物,通过研究芽孢杆菌对正常羔羊及感染大肠杆菌的羔羊肠胶质细胞分泌因子IL-1β、IL-6和GFAP的表达及肠道发育的影响。为探讨芽孢杆菌对羔羊EGCs分布以及对感染大肠杆菌羔羊EGCs分泌因子的影响提供参考。方法:本试验的研究动物为28只健康的3月龄新疆哈萨克羔羊,随机分为4组,空白对照组:羔羊喂食基础日粮,同时进行生理盐水灌服干预;芽孢杆菌处理组（BH）:羔羊口服108CFU以上的芽孢杆菌HS06菌液;大肠杆菌感染组（EC）:羔羊口服108CFU以上的产肠毒素大肠杆菌K88;芽孢杆菌治疗组（BH+EC）:羔羊口服两种108CFU以上的菌液,产肠毒素大肠杆菌（ETEC）K88感染后添加芽孢杆菌HS06。正常饲喂一周后,感染组羔羊灌服ETEC K88菌株不少于14.3×108CFU每只,连饮3 d,待羔羊出现临床症状,将其宰杀,采取十二指肠、回肠、空肠、盲肠、结肠与直肠各2-3 cm组织块,用4%多聚甲醛液进行固定,用于石蜡切片染色、ELISA及免疫组织化学（IHC）试验。结果:1.由HE染色结果可知,大肠杆菌感染组羔羊各肠段上皮淋巴细胞数显著增加（P<0.05）,杯状细胞数显著减少（P<0.05）,肠绒毛的长度、V/C值显著下降（P<0.05）;与大肠杆菌感染组相比,芽孢杆菌处理组羔羊各肠段上皮淋巴细胞数显著降低（P<0.05）,杯状细胞数显著增加（P<0.05）,肠绒毛的长度、V/C值显著上升（P<0.05）。表明芽孢杆菌不仅对羔羊的肠道发育有增强作用,还有利于修复大肠杆菌造成的肠道损伤。2.由免疫组织化学和ELISA试验结果可知,在空白组,IL-1β和IL-6的分布以羔羊各肠段的黏膜上皮层以及黏膜固有层为主,黏膜下层次之;在大肠杆菌感染组,IL-1β和IL-6在羔羊各肠段内分布以黏膜上皮层以及黏膜固有层为主,固有肌层次之。与其他组相比,芽孢杆菌处理组羔羊各肠段内IL-1β和IL-6的水平显著下调（P<0.05）;芽孢杆菌治疗组羔羊各肠段内IL-1β和IL-6的水平显著上升（P<0.05）;经相关性分析,IL-1β和IL-6的表达呈显著的中度正相关关系（R=0.572,P<0.01）。表明芽孢杆菌拥有一定的抗炎性,通过调节IL-1β和IL-6的表达水平,从而增强羔羊的免疫能力。3.由免疫组织化学试验结果可知,羔羊小肠和大肠内GFAP的分布以黏膜上皮层以及黏膜固有层为主。与大肠杆菌感染组相比,芽孢杆菌处理组和芽孢杆菌治疗组羔羊各肠段内GFAP的MOD值显著上调（P<0.05）,经相关性分析,GFAP与IL-1β、IL-6的表达呈显著的强正相关关系（P<0.05）。表明芽孢杆菌能够促使羔羊肠道内GFAP的表达增加,诱导EGCs的增殖,提高机体抵御致病性大肠杆菌感染的能力,增强羔羊肠黏膜免疫的活性。结论:芽孢杆菌能够维持羔羊肠黏膜屏障的完整性,有助于羔羊肠道发育,提高动物免疫水平;而在大肠杆菌感染时期,芽孢杆菌不仅显著提高羔羊肠道免疫细胞数与V/C值,并且能促进IL-1β和IL-6的表达,诱导GFAP持续高表达于肠道内,从而促进EGCs的增殖分化,增强机体抵御病原菌感染的能力,显著提升羔羊的免疫机能。
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