弓形虫(Toxoplasma gondii,Tgondii)作为一种常见的人畜共患寄生虫,能感染所有温血动物。孕妇妊娠期感染,会对胎儿造成严重损害,如胎儿畸形、流产或死胎,免疫力低下的病人感染后会出现淋巴结病或眼弓形虫病。日本血吸虫(Schistosoma japonicum,S.japonicum)是我国最著名的人畜共患寄生虫,可以感染所有哺乳动物,损害免疫系统、神经系统、消化系统,最终造成机体营养流失过多而死亡。自新中国成立后至今,日本血吸虫病患者达到1200余万之多,严重威胁到我国人民的公共卫生安全以及每年给我国畜牧业造成重大经济损失。目前,弓形虫、日本血吸虫检测方法主要分为病原学检测、免疫学检测、分子生物学检测。这些传统的检测方法,都存在诸多缺陷,如:灵敏度低,检测流程繁琐,费时费力,需要昂贵的实验仪器,无法满足基层工作者在现场快速检测。为此,本研究尝试使用磁性纳米颗粒探针-暗场显微镜法对弓形虫和日本血吸虫卵进行检测,实现检测流程简单快速,高灵敏,低要求。本研究首先将表面修饰protein A的磁性纳米颗粒与目标寄生虫的抗体进行孵育,制备成探针。然后将探针与样本溶液在室温下混合振荡30 min,再通过磁力架拉取探针与寄生虫形成的复合物,洗涤重悬后,在暗场显微镜下进行点样观察。最后通过灵敏度实验确定该方法的检测下限,通过动物实验确定该方法在实际临床检测上是否可行。实验结果表明,探针牢牢结合在虫体表面,在暗场下衍射出金黄色亮光,使得虫体轮廓肉眼清晰可见,弓形虫呈现出金黄色月牙状,日本血吸虫卵呈现出金黄色椭圆形。弓形虫检测限可达到10000个/mL,与PCR检测弓形虫的检测限相同。日本血吸虫卵检测限可达到1000个/mL。用该方法在阳性动物样本上均成功检测出目标病原体。总之,我们使用的磁性纳米颗粒探针-暗场显微镜法对弓形虫和日本血吸虫卵检测效果良好,且简单快速、灵敏度高、特异性强,适合用于基层检测。