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杆状病毒表达系统是目前应用最为广泛的真核细胞表达系统之一。本论文在Bac-to-Bac杆状病毒表达系统的基础上，研究了信号肽序列和启动子序列对分泌表达外源蛋白Luciferase的影响。论文包括三个章节：
第一章以综述的形式介绍了杆状病毒、杆状病毒表达载体的发展历史及其优缺点。并且本章从上游启动子调控序列的优化、分泌型杆状病毒表达载体的构建、以及内质网分子伴侣系统工程学改造三方面，概述了杆状病毒表达系统优化改造的研究进展。
第二章研究了5种不同的信号序列对Bac-to-Bac杆状病毒表达系统分泌效率的影响。将编码AcMNPV的V-cathepsin、EGT、GP64以及蜜蜂的Mellitine，家蚕的Bombyxin这五个蛋白的N端信号肽序列分别与Luciferase报告基因融合克隆到转移载体pFastBacDual上，进而构建了5株能融合表达信号肽与Luciferase报告基因的重组病毒。用这些重组病毒感染Sf9细胞，并分别检测总的和分泌到培养基中的Luciferase活性量。结果显示，带有信号肽的重组病毒载体感染的样品中，分泌到培养基中的Luciferase活性量远远高于没有信号肽的对照病毒，且不同信号肽对分泌率的影响程度是不一样的，其中EGT的信号肽分泌表达的效果最佳。
第三章在信号肽研究结果的基础上，进一步研究了启动子对分泌效率的影响。本论文研究了四种具有不同表达时相特征的杆状病毒基因启动子。除了极晚期超量表达基因polyhedrin的启动子外，本实验另外构建了带有极早期基因Opie2启动子，AcMNPV晚期基因p6.9和vp39启动子的重组杆状病毒。用这四株重组病毒载体在sf9细胞中表达Luciferase，并分析Luciferase的分泌效率。结果显示，信号肽相同的情况下，启动子对蛋白质的分泌效率是存在影响的。在本实验中，polyhedrin启动子并不是用于分泌表达的最佳选择，而p6.9基因的启动子序列能更有效的促进Luciferase分泌到细胞培养基中。