【摘 要】
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目的:体外研究DPP-4抑制剂（西格列汀）对高糖作用下大鼠肾小球内皮细胞（Rat glomerular endothelial cells,RGECs）坏死性凋亡（Necroptosis）途径及炎性细胞因子IL-6表达的影响。方法:1.取对数生长期的RGECs,分为正常组（5.5mmol/L葡萄糖,N组）、甘露醇组（5.5mmol/L葡萄糖+24.5mmol/L甘露醇,M组）、高糖组（30mmol
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目的:体外研究DPP-4抑制剂（西格列汀）对高糖作用下大鼠肾小球内皮细胞（Rat glomerular endothelial cells,RGECs）坏死性凋亡（Necroptosis）途径及炎性细胞因子IL-6表达的影响。方法:1.取对数生长期的RGECs,分为正常组（5.5mmol/L葡萄糖,N组）、甘露醇组（5.5mmol/L葡萄糖+24.5mmol/L甘露醇,M组）、高糖组（30mmol/L葡萄糖,HG组）和药物组（30mmol/L葡萄糖+1μmol/L西格列汀,D组）。2.以不同浓度的西格列汀处理RGECs作用48h,CCK法检测RGECs活性,筛选最佳药物浓度。3.采用免疫细胞化学方法检测各组中TNF-α、RIP1、RIP3及IL-6（Interleukin-6,IL-6）蛋白的表达情况。4.采用实时荧光定量聚合酶链反应（Real-Time polymerase chain reaction,RT-PCR）方法检测各组中TNF-α、RIP1、RIP3及IL-6的m RNA表达情况。结果:用CCK8试剂盒检测细胞活性,结果表明,当DPP-4抑制剂（西格列汀）药物浓度为1μmol/L,细胞活性最强。免疫细胞化学:TNF-α、RIP1、RIP3及IL-6蛋白主要在RGECs胞浆中表达,HG组的上述指标蛋白表达值较N组和M组明显增加（P<0.05）,D组上述指标蛋白表达值较HG组表达量明显减少（P<0.05）,余组间上述指标蛋白表达值无差异。RT-PCR:HG组的TNF-α、RIP1、RIP3及IL-6的m RNA表达值较N组及M组明显增加（P<0.05）,D组上述指标的m RNA表达值较HG组明显减少（P<0.05）,余组间上述指标的m RNA表达值无差异。结论:RGECs在高糖作用下Necroptosis的发生明显增加,炎性细胞因子IL-6表达也明显增加。使用DPP-4抑制剂（西格列汀）干预后,TNF-α、RIP1、RIP3及IL-6的m RNA和蛋白表达量均明显减少。DPP-4i（西格列汀）可能通过抑制高糖作用下RGECs中TNF-α表达,部分阻断Necroptosis途径的激活,减少高糖作用下RGECs中炎性细胞因子IL-6表达,进一步减轻炎症反应。
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