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目的:进一步验证精子发生相关蛋白SPATA1与鞭毛内转运蛋白IFT20之间的相互作用，探索SPATA1在精子发生中的表达、定位及作用。 方法:IFT20和SPATA1蛋白表达质粒转染CHO细胞，免疫荧光检测其共定位;同时，IFT20/Flag和SPATA1/GFP共转染COS-1细胞，细胞裂解物进行免疫共沉淀，进一步验证两者之间的相互作用。构建SPATA1/pEGFP-N2质粒，将其和对照质粒pEGFP-N2转染到COS-1细胞中，细胞裂解物进行Western blotting，检测SPATA1多克隆抗体的特异性。以SPATA1和IFT20为一抗，免疫荧光染色观察两者在睾丸生精细胞的表达与定位。收集野生型小鼠附睾精子，Western blotting和免疫荧光检测SPATA1在成熟精子中的表达。提取Ift20基因敲除小鼠和对照小鼠睾丸的总蛋白以及制备睾丸组织切片，Western blotting和免疫荧光检测IFT20缺失对SPATA1在睾丸组织中的表达与定位的影响。 结果:细胞内蛋白定位实验结果显示IFT20和SPATA1在CHO细胞中部分共定位，形成簇团;COS-1细胞共转染IFT20/Flag和SPATA1/GPF表达质粒时，Flag抗体将IFT20和SPATA1同时沉淀下来。Western blotting实验显示制备的SPATA1抗体能有效识别该蛋白。小鼠睾丸组织和附睾成熟精子的免疫荧光染色显示，在圆形精子细胞的顶体检测到SPATA1蛋白信号，但在成熟精子未发现该蛋白的表达。IFT20也定位于圆形精子细胞的顶体。与对照组小鼠（Ift20flox/+;Stra8-Cre）相比，IFT20缺失对睾丸组织中SPATA1蛋白表达水平没有显著影响。免疫荧光结果显示，精子发生的Ⅳ-Ⅻ期间，Ift20基因敲除小鼠和对照小鼠中SPATA1表达与定位相似;在精子发生第12阶段(step12)，Ift0基因敲除小鼠的精子细胞核未正常伸长，SPATA1未沿着顶体分布。 结论:SPATA1与IFT20形成蛋白复合体，并可能通过调控IFT20介导的蛋白运输参与精子顶体形成。