目的研究山核桃叶总黄酮对小鼠出血时间和凝血时间的影响,对小鼠心肌缺血作用的影响,对自发性高血压大鼠降血压作用的影响,对小鼠高脂血症作用的影响,通过这四方面的初步研究来探讨山核桃叶总黄酮对心血管系统的保护作用,为山核桃叶总黄酮的进一步开发应用提供实验依据。方法(1)山核桃叶总黄酮的制备:采用回流提取的方法,获得山核桃叶提取液,再与聚酰胺混合,减压旋蒸至无水,上层析柱,先用30%乙醇洗脱,再用40%乙醇洗脱,收集40%乙醇洗脱液,减压旋蒸至无水,最后通过高效液相测定收集产物中的总黄酮含量。(2)山核桃叶总黄酮对小鼠出血时间和凝血时间的影响:ICR小鼠,适应性饲养一周后,根据体重随机分为4组,正常对照组,低剂量组(50.0mg/kg)、中剂量组(1 00.Omg/kg)、高剂量组(200.0mg/kg),每组10只,连续灌胃给药16天,采用剪尾法测定出血时间,采用波片法测定凝血时间。(3)山核桃叶总黄酮对小鼠心肌缺血作用的研究:ICR小鼠,适应性饲养一周后,根据体重随机分为5组,正常对照组,模型对照组,阳性对照组(普萘洛尔20.0mg/kg)、低剂量组(1OO.Omg/kg)、高剂量组(200.0mg/kg),每组10只,连续灌胃30天,第28天皮下注射盐酸异丙肾上腺素30.0 mg//kg,第29天再次皮下注射盐酸异丙肾上腺素30.0 mg/kg,眼球取血,测定血清中乳酸脱氢酶和肌酸激酶含量,称量心脏湿重,110℃烘烤8小时后,再称其干重,计算心脏指数和心肌含水量。(4)山核桃叶总黄酮对自发性高血压大鼠降血压作用的研究:自发性高血压大鼠(SHR),根据血压基础均值随机分为5组,模型对照组、卡托普利组(15.0mg/kg)、低剂量组(50.0mg/kg)、中剂量组(100.Omg/kg)、高剂量组(200.0mg/kg),每组10只,连续给药31天,每隔一周,观察测定大鼠血压SBP、DBP、MBP的变化情况。(5)山核桃叶总黄酮对高脂血症小鼠的研究:ICR小鼠,雌性,给予高脂饲料23天,建立高脂血症模型,随机分组,即模型对照组,低剂量组(100.0mg/kg),高剂量组(200.0mg/kg),以及正常对照组,然后连续给药60天,其中正常对照组给予普通饲料,模型对照组、低剂量组、高剂量组给予高脂饲料,末次给药后,禁食16小时,称重,测量体长(从鼻尖至肛门距离),小鼠摘眼球取血,解剖小鼠,摘取各个脏器,检测血清中总胆固醇、甘油三酯、高密度脂蛋白胆固醇、低密度脂蛋白胆固醇、谷丙转氨酶、谷草转氨酶、尿酸、肌酐含量。并通过肝脏病理切片HE染色,观察肝脏形态学变化。结果(1)山核桃叶总黄酮的制备:所制备的山核桃叶总黄酮,5个已知的黄酮类物质(白杨素、汉黄芩素、小豆蔻明、球松素查尔酮、松属素)的总含量达58.6%。(2)山核桃叶总黄酮对小鼠出血时间和凝血时间的影响:山核桃叶总黄酮在50.0mg/kg、100.Omg/kg、200.0mg/kg三个剂量灌胃给药,均能在不同程度上延长小鼠出血时间和凝血时间,为山核桃叶总黄酮抗血栓的作用研究,提供了一定的实验基础。(3)山核桃叶总黄酮对心肌缺血小鼠作用的研究:山核桃叶总黄酮100.0mg/kg、200.0mg/kg二个剂量组均能显著降低心肌缺血小鼠血清中肌酸激酶的含量,而200.0mg/kg剂量组在一定程度上能降低心肌缺血小鼠血清中乳酸脱氢酶的水平,但100.0mg/kg、200.0mg/kg二个剂量组都不能通过降低细胞肿胀程度来降低心肌缺血小鼠心肌含水量。(4)山核桃叶总黄酮对自发性高血压大鼠作用的研究:山核桃叶总黄酮50.0mg//kg、100.0mg/kg、200.0mg/kg三个剂量组,均能在不同程度上降低SHR收缩压,100.Omg/kg、200.0mg/kg二个剂量组,均能在不同程度上降低SHR舒张压和平均动脉压。(5)山核桃叶总黄酮对高脂血症小鼠作用的研究:小鼠高脂血症模型建立后,连续给药60天,与对照模型组相比,山核桃叶总黄酮低剂量组(1OO.Omg/kg)和高剂量组(200.0mg/kg)均不能降低总胆固醇、甘油三酯和低密度脂蛋白胆固醇,不能升高高密度脂蛋白胆固醇,但山核桃叶总黄酮,对高脂血症小鼠肝脏和肾脏的功能影响不大,甚至具有一定的保护作用。结论制备的山核桃叶总黄酮,已知的5个黄酮类物质总含量达58.6%,可做为后续药理实验的试用药。山核桃叶总黄酮能显著延长小鼠的出血时间和凝血时间,具有较好的降血压作用和抗心肌缺血作用,对肝脏具有一定的保护作用,但对降血脂作用较弱。山核桃叶总黄酮能较好地保护心血管系统,为山核桃叶总黄酮的进一步开发应用提供实验依据。