目的:建立一种灵敏度高、特异性强、成本低,适于基层检测孕妇血清中HSVDNA的方法,并初步评价该技术在临床应用价值。方法:分别设计了HSV-Ⅰ和HSV-Ⅱ型特异的环介导等温扩增(Loop-mediatedisothermal amplification LAMP)引物,并利用该技术建立了快速检测HSV DNA的反应体系。并针对影响LAMP反应的因素,对反应体系进行了优化,确定了LAMP检测HSV DNA的最佳反应条件,初步鉴定了我们所建立方法的敏感性和特异性。在此基础上,对我们所收集的96例孕妇外周血标本进行了检测,并与传统的ELISA和荧光定量PCR做了比较。结果:通过对LAMP检测HSV DNA反应体系的优化,实验结果表明温度是LAMP最大的影响因素,甜菜碱也是LAMP反应能否进行的关键因素,镁离子等其他因素相对温度和甜菜碱的影响较小。特异性鉴定结果表明仅单纯疱疹病毒型特异性检测为阳性,而对同属的其他类型的疱疹及人类基因组DNA检测均为阴性,酶切鉴定结果进一步证明了扩增的特异性。敏感性检测下限为每反应管(25μl的反应体系)10个拷贝。对96例孕妇血清标本分别进行HSV-ⅠDNA和HSV-ⅡDNA检测,HSV-Ⅰ阳性例数为9例,HSV-Ⅱ阳性例数为16例,并与ELISA和FQ-PCR检测结果作比较。以FQ-PCR为检测金标准,LAMP与FQ-PCR阳性符合率大于94%,两种方法差异不显著(P＞0.01);而ELISA与FQ-PCR相比,存在显著性差异(P＜0.01)。结论:实验表明LAMP技术用于HSV DNA检测具有与FQ-PCR相近的特异性和敏感性,可靠性远高于目前普及的ELISA法。并且LAMP技术简单快速、结果易判断、成本低。如果进一步优化、完善和推广,我们相信该技术将会在孕妇HSV感染的早期诊断和出生缺陷及传染病的预防上发挥重要作用。