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中枢神经系统疾病的发病率随着人类寿命的增长以及社会的发展而增加,因各种创伤、老龄化等因素,以致脊髓外伤和脊髓脱髓鞘疾病的发病率逐渐升高。但是由于中枢神经系统的生理特性,即再生能力差,自然病史或传统的手术、药物等治疗方法,使受损的神经元再生根本是不可能的,取而代之的只是增生的胶质细胞,最终形成胶质瘢痕。从结构上和功能上都存在部分缺失现象,即使功能上有部分恢复,也只是由于神经元的可塑性产生的效应,并且数量有限,不可能完全替代。胶质瘢痕不但没有电生理活动和功能,反而阻碍神经纤维的再生和通过。这些病理特点是困扰医学界的难题。致使当今中枢神经系统损伤的治疗效果非常不理想。随着造血干细胞等发现,国际间医学科学家致力于神经干细胞(NSC)是否存在的研究,近十年来,业已发现成年哺乳动物,包括人类,中枢神经系统存在具有一定分裂、分化潜能的神经干细胞。 本实验利用雪旺细胞(SC)可以分泌各种神经营养素(如层粘蛋白等),并诱导神经元的生长锥生成、生长和延长,还可抑制胶质瘢痕形成等,有利于受损神经在组织结构上修复、再生,在功能传导上再通的优势;结合神经干细胞具有多向分化潜能,在移植脊髓损伤区后可以转化为神经元的特点。采取两种细胞联合移植,取长补短,综合优势,从而达到结构、功能上重建的目的。 本实验将从体内、外两方面证明联合移植的优越性。将神经干细胞和雪旺细胞分别分离、纯化及扩增后,体外共培养观察雪旺细胞对神经干细胞的转化、生长的影响;同时一并混合回输脊髓损伤处,观察大鼠脊髓损伤恢复情况。结果显示:(1)体外实验SC可促进NSC向神经元转化,并促进神经元生长锥生长和延长。(2)SC和NSC联合移植大鼠脊髓损伤处,在损伤区可见细胞存活、迁移,大鼠瘫痪侧肢体水肿减轻、感觉、运动有一 大津医科火学硕士研究生论文定程度恢复。(3)建立一种改良的大鼠脊髓半横断损伤模型,改进技术,克服缺点,使其操作简单、实用,提高了实验效率。 总之,在细胞生物学上,综合了这两种细胞的生理优势,扬长避短,更促进了神经细胞的有效再生、修复,既补充丢失的神经元,又保护了未死亡的神经元,并且促进神经轴突的延长,提高了神经再通率和存活力,提高它们之间的联系。将为人类治疗神经系统疾病,尤其脊髓损伤,奠定了理论基础和实验基础。充分体现了本课题的实用性、创新性和科学性。