利用BSA-seq图位克隆两个水稻重要基因

来源 :福建农林大学 | 被引量 : 2次 | 上传用户:bjl123456
下载到本地 , 更方便阅读
声明 : 本文档内容版权归属内容提供方 , 如果您对本文有版权争议 , 可与客服联系进行内容授权或下架
论文部分内容阅读
水稻分蘖是营养生长的重要特性,其分蘖数决定了有效穗数,进而决定了水稻产量。穗是水稻的营养器官,由若干小花和小穗组成。小花和小穗在不同水平上的发育决定了水稻穗部性状和产量。因此分蘖和穗部发育是决定营养生长和生殖生长的两个重要农艺性状。本论文分离了在水稻籼稻品种明恢86组织培养过程中发现的两个突变体srt1和pshl-1/2,通过将BSA和全基因组测序方法定位和克隆了这两个基因,并对这两个基因的功能进行了初步分析。其结果如下:1. Sterile and Reduced Tillering 1:现单杆和雌性不育的突变体。(1)srtl表现为很少或不分蘖。与对照明恢86(分蘖数为9.0±3.6)相比,突变体srtl的分蘖明显少于对照,只有1-4个分蘖(0.5±0.7)。(2)srtl的茎比野生型粗壮。从茎的横切片结果来看,srtl的茎微管束发育比野生型多,能提供足够的养分给整个植株;纵切结果显示其细胞排列比野生型更有规律。(3)srtl的叶片显得比野生型长且宽。野生型与突变体srt1叶片的长宽比分别为:52.2±3.34:59.5±2.1和1.55±0.2:2.05±0.1。(4)srtl表现为完全不育。花药碘染实验显示突变体的花药表现正常。正反交实验结果显示,用srtl作为父本,野生型作为母本结实率为9.9土6.8%,然而反过来srt1作为母本时颗粒无收,说明srtl表现为雌性不育。(5)通过BSA-seq方法比较突变DNA池和野生DNA池间SNP频率分布,计算CAAFD值,发现在水稻4号染色体长臂末端约(29-34M)处CAAFD有一个明显的峰。在该期间开发INDEL标记,将目标基因定位在231Kb范围内。(6)在231kb区间内共有37个ORFs。我们发现其中LOC_Os04g56780与野生型相比有21个碱基缺失。LOC_Os04g56780编码水稻中与拟南芥Wuschel (AtWUS)的同源基因OsWUS。(7)突变体中OsWUS的21bp发生在第一个外显子上,使OsWUS的一个高度保守结构域Homeobox中缺失了7个氨基酸。该缺失可能导致OsWUS功能丧失,说明Homeobox结构域在OsWUS的功能上起重要作用。2. Pepper-Shaped husk 1:一个小花形状异常的突变体。(1)突变体pshl-1表现为穗变短且密,其穗长仅有野生型明恢86的20%。pshl-1的小花呈现辣椒状,其外稃正常,外稃明显比野生型小。(2)pshl-1的结实率仅有5.8%±7.2,远远小于野生型的结实率(85.2%±4.9)。开花时突变体的表型不正常,仅有一小部分突变体6.55%±5.3的花开启后能正常关闭,而野生型种大部分(84.65%±6.7)的花都能正常开花及关闭。(3)psh1-1的种子比野生型要小。突变体的粒长(8.7±0.48)和粒宽(1.975±0.07)明显小于野生型。pshl-1的粒形表现为辣椒状,其千粒重(28.67±0.65)明显低于野生型(15.0±1.18)。(4)通过F2群体的遗传分析显示,突变体pshl-1表现为辣椒颖和低结实率的性状受一对隐性等位基因控制。(5)应用BSA-seq方法定位PSH1,通过计算CAAFD值发现在水稻4号染色体断臂末端0-3Mb处有一个高峰。经连锁分析将该基因定位在218Kb的区间内。(6)该218Kb区间内有31个ORFs。通过不同基因池中序列比对发现,LOC_Os04g01590基因内部的一个单碱基替换(G→T)导致终止密码TAA的产生,是蛋白质提前终止。(7) LOC_Os04g01590编码精氨酸酶。它有6个外显子,编码340个氨基酸。突变体pshl-1中的第三个外显子上的G到T的替换,及pshl-2中的第二个外显子上的G到T的替换都能产生终止密码TAG,使蛋白质提前终止。这些结果显示突变体表现出的突变性状是由基因LOC_Os04g01590突变造成的。(8)氧化应激分析显示突变体pshl和野生型无明显差异。
其他文献
细菌对磷霉素的耐药性极低 ,由于磷霉素抑制细菌细胞壁合成 ,破坏其完整性 ,有利于其他抗菌药进入细菌体内 ,通过不同的作用机制而杀灭细菌。磷霉素与其他抗菌药无交叉耐药 ,
露石处理是一种效果良好的新建CC+AC复合式路面结构刚柔界面的处理方式。通过室内试验,研究露石剂喷洒量、喷洒时间、冲洗时间及混凝土级配等对露石高度的影响。采用室内拉拔
回 回 产卜爹仇贱回——回 日E回。”。回祖 一回“。回干 肉果幻中 N_。NH lP7-ewwe--一”$ MN。W;- __._——————》 砧叫]们羽 制作:陈恬’#陈川个美食 Back to yield
利用福建省487户抽样农户调查数据,从农户对林改相关配套政策的参与度与满意度角度,构建多元回归模型,分析林改林业配套政策对农户林业劳动力和资金投入的影响。结果表明:关
为高效、精准调控作物蒸腾耗水,本研究以西北旱区典型C3作物(大豆和葡萄)和C4作物(玉米)为试验对象,采用田间试验和模型模拟相结合的方法,于2012~2015年在甘肃省武威市中国农
前不久,获悉余华的《兄弟》在法国获首届"国际信使外国小说奖"(Prix Courrier International)。《国际信使》是在法国知识界有影响的杂志,据悉有130余部今年在法国出版的外国
水土保持区划是科学开展水土保持工作,制定水土保持规划的重要依据,将在较长时间内有效地指导水土保持规划和水土保持工作。在全国水土保持区划背景下,在水利部太湖流域管理局的
现当今,随着我国经济的快速发展,而轴承与齿轮作为所有机械设备构造中必用的机械部件,自身的质量与性能成为了可直接影响工业机械设备的性能与效率的重要决定因素,同时也就牵
近年来,按照全省优先发展畜牧业、建设牧业大省的战略部署,洮南市畜牧业管理局从实际出发,组织实施了“草变奶”、“草变肉”、“粮变奶”、“粮变肉”等工程,通过引进大企业
近两年,全国各级档案馆纷纷启动了在馆抗日战争档案的梳理、鉴定和汇编工作。其中,侵华日军档案汉译是此项工作中的重要一环。档案汉译并非简单的文本翻译,它是资源配置、工