地乌药材系统鉴定及质量评价

来源 :湖北中医药大学 | 被引量 : 0次 | 上传用户:FANSHENGHUA2009
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药用植物的主要药理活性成分通常为次生代谢产物,而次生代谢产物是植物适应环境的产物,药用植物次生代谢产物除受遗传因素调控外,地理环境、气候条件等生态因子亦对其产生重要影响,即环境导致同种异地药材质量的不同。我国野生地乌资源分布广泛,受地域影响各产地地乌药材质量势必存在显著差异,地乌药材基原的准确鉴别及优质药材产地选择对于其合理开发及临床应用至关重要,然而目前基于多产地地乌药材的综合质量评价体系尚未构建。鉴于此,本研究依据中国植物志记载的地乌产地分布区域,完成了8个省市16个产地的野生地乌资源收集,通过性状鉴别、显微鉴别以及理化鉴别等传统中药鉴别方法对来自16个产地的地乌样品进行鉴别,鉴定结果均与文献及《湖北省中药材质量标准》(2018版)记载的正品地乌药材特征一致。同时,首次基于DNA条形码ITS2序列成功构建了地乌药材的快速鉴别体系,传统鉴别技术结合DNA条形码鉴别技术的地乌药材系统鉴别体系确保了地乌药材鉴定结果的准确性,为其临床安全用药奠定基础。本研究构建的综合鉴定体系确保了采集的地乌药材的基原准确,在此基础上运用HPLC完成了16产地地乌药材五种药理活性成分(anhuienoside E、glycoside St-14a、hemsgiganoside B、hederasaponin B及flaccidosideⅡ)的含量测定。差异性分析发现anhuienoside E以及hemsgiganoside B在湖北长阳都镇湾地乌样品中含量显著高于其他产地(P<0.05);贵州毕节、湖北恩施板桥及元堡地乌样品中皂苷glycoside St-14a最高(P<0.05);而湖北恩施板桥地乌样品中皂苷flaccidosideⅡ显著高于其余各产地样品(P<0.05);湖北恩施板桥及湖北五峰白溢坪地乌样品皂苷hederasaponin B含量最高(P<0.05)。同时,湖北恩施板桥地乌样品中5种检测成分含量之和最高。基于五种化学成分含量的聚类分析表明,与其他产地相比,湖北地乌与重庆、安徽和贵州等地区的地乌药材在化学成分及含量上存在更大的相似性,在聚类热图上归为一大支。此外,本研究还采用紫外-可见光分光光度法对16产地地乌药材的三萜总皂苷含量进行测定,结果表明各产地地乌药材总皂苷含量差异显著。其中,贵州毕节地乌药材总皂苷含量最高(P<0.05),其次为湖北恩施板桥、安徽歙县、湖南桑植县,而湖北神农架及湖南衡山地乌药材三萜总皂苷含量最低。本研究构建了地乌药材传统鉴定及分子鉴别的复合鉴定体系,确保地乌药材基原准确。同时,分别使用HPLC法及紫外-可见光分光光度法对16个不同产地地乌药材的5个皂苷成分及总皂苷成分进行含量测定,以地乌药材各成分的含量及总皂苷含量作为其质量评价指标,综合分析了各产地地乌药材化学成分含量差异,并以此确定了优质地乌药材的产地。以上研究为地乌药材产地选择及临床用药安全奠定基础,同时为后期地乌优质品种选育提供一定数据支撑。
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