论文部分内容阅读
目的观察高糖及不同浓度胰岛素对肾小管上皮细胞通透性的影响及其与间隙连接蛋白(Connexin43)表达的关系。方法体外培养的人肾小管上皮细胞随机分为6组:①正常对照组,②高糖组(30mmol/L),③较低浓度胰岛素组(10-9 mol/L),④较高浓度胰岛素组(10-7 mol/L),⑤高糖(30mmol/L)+较低浓度胰岛素组(10-9 mol/L),⑥高糖(30 mmol/L)+较高浓度胰岛素组(10-7 mol/L),检测不同分组中肾小管上皮细胞对白蛋白的通透性及Connexin43的表达。利用Transwell小室检测不同分组肾小管上皮细胞对白蛋白的通透水平,用RT-PCR检测Connexin43 mRNA的表达,用免疫荧光分析Connexin43蛋白的表达。并观察不同分组中肾小管上皮细胞对白蛋白的通透性以及Connexin43的表达二者之间有无相关性。结果1.(1)高糖组单层肾小管上皮细胞对白蛋白的通透性升高,与正常对照组比较其差异有显著性(P<0.05)。(2)较低浓度胰岛素组单层肾小管上皮细胞对白蛋白通透性升高,与正常对照组比较差异无显著性(P>0.05)。较高浓度胰岛素组单层肾小管上皮细胞对白蛋白的通透性升高,与正常对照组相比差异有显著性(P<0.05)。较低浓度胰岛素与较高浓度胰岛素对肾小管上皮细胞通透性的影响二者有显著差异(P<0.05)。(3)高糖加较低浓度胰岛素组单层肾小管上皮细胞对白蛋白通透性与正常对照组比较增加,其差异有显著性(P<0.05),与高糖组比较通透性降低,差异无显著性(P>0.05)。高糖加较高浓度胰岛素组单层肾小管上皮细胞对白蛋白通透性与正常对照组比较增加,其差异有显著性(P<0.05),与高糖组比较通透性减少,差异有显著性(P<0.05)。高糖环境下,较低浓度胰岛素与较高浓度胰岛素对肾小管上皮细胞通透性的影响二者有显著差异(P<0.05)。2.(1)高糖组肾小管上皮细胞Connexin43与正常对照组比较表达减少,其差异有显著性(P<0.05);(2)较低浓度胰岛素组肾小管上皮细胞Connexin43的表达减少,与正常对照组比较差异无显著性(P>0.05)。较高浓度胰岛素组肾小管上皮细胞Connexin43的表达与正常对照组相比减少,差异有显著性(P<0.05)。较低浓度胰岛素与较高浓度胰岛素对肾小管上皮细胞Connexin43表达的影响二者差异有显著性(P<0.05)。(3)高糖加较低浓度胰岛素组肾小管上皮细胞Connexin43与正常对照组比较表达减少,差异有显著性(P<0.05),与高糖组比较表达增加,差异无显著性(P>0.05)。高糖加较高浓度胰岛素组肾小管上皮细胞Connexin43的表达与正常对照组比较表达减少,差异无显著性(P>0.05),与高糖组比较表达增加,差异有显著性(P<0.05)。高糖环境下,较低浓度胰岛素与较高浓度胰岛素对肾小管上皮细胞Connexin43表达的影响二者差异有显著性(P<0.05)。3.经直线相关分析,高糖及不同浓度胰岛素作用下肾小管上皮细胞对白蛋白的通透性与Connexin43的表达呈负相关。结论1.单纯高糖或胰岛素刺激下,单层肾小管上皮细胞通透性增加,Connexin43表达减少。2.高糖环境下,较高浓度胰岛素可以拮抗高糖对肾小管上皮细胞通透性及Connexin43表达的作用。3.肾小管上皮细胞对白蛋白的通透性与间隙连接蛋白Connexin43的表达呈负相关。高糖及不同浓度胰岛素诱导下间隙连接蛋白表达的改变可能是肾小管上皮细胞通透性改变的重要机制之一。