目的：通过体外培养大鼠心肌细胞，建立柯萨奇病毒体外感染心肌细胞模型，探讨益心康对感染CVB3病毒心肌细胞的保护及对病毒的抑制作用，为该药的进一步研究及临床应用提供理论依据。　　 方法：　　 1、心肌细胞原代培养：体外原代培养3天的SD大鼠心肌细胞。　　 2、Hela细胞的培养。　　 3、制备病毒：扩增CVB3病毒的毒力，测定CVB3病毒的毒力(TCID50)。　　 4、制备益心康提取物。　　 5、测定益心康提取物及利巴韦林注射液对心肌细胞的最大无毒剂量(TCID0)。　　 6、药物的干预：取单层生长状态良好的乳鼠心肌细胞，分成4组：①细胞对照组;②病毒对照组;③益心康组;④利巴韦林组。培养24h、48h在倒置显微镜下观察细胞病变(CPE)，待病毒对照组CPE出现100％（++++）时，停止培养。　　 7、疗效指标的检测　　 (1)倒置显微镜下观察各组24小时、48小时心肌细胞的形态学变化及CPE情况。　　 (2)MTT法测定48小时各组心肌细胞存活率。　　 (3)ELISA法测定48小时各组CK-MB及cTnI，比较益心康及利巴韦林对心肌细胞的保护作用。　　 (4)RT-PCR法测定各组柯萨奇病毒mRNA的含量，比较益心康及利巴韦林对柯萨奇病毒复制的抑制作用。　　 8、统计学处理：采用SPSS16.0统计软件分析，数据处理用(-X)±SD表示，各组均数比较采用方差分析及两两比较，两组间比较用t检验，P＜0.05为差异有统计学意义。　　 实验结果:　　 1、形态学观察：观察各组心肌细胞24小时、48小时的形态学变化和细胞病变(CPE)。正常对照组24小时、48小时心肌细胞贴壁生长，细胞生长旺盛，向周围伸出放射状突起，心肌细胞呈同步搏动，节律规整，搏动有力，60-80次/min；病毒对照组心肌细胞，在接种病毒24小时后，细胞仍搏动但速度较慢，节律欠规整，开始出现细胞病变。接种病毒48小时后，可见细胞团缩、破碎等细胞病变，基本停止搏动；益心康组、利巴韦林组与病毒对照组比较，病变明显减轻，益心康组细胞病变轻于利巴韦林组。　　 2、用MTT法测定各组细胞存活率结果显示：正常组、益心康组、利巴韦林组细胞存活率均明显高于病毒对照组；益心康组细胞存活率高于利巴韦林组。　　 3、ELISA法测定各组CK-MB及cTnI的结果显示：正常细胞组、益心康组、利巴韦林组细胞上清液CK-MB、cTnI均明显低于病毒对照组，益心康组CK-MB、cTnI低于利巴韦林组。　　 4、应用RT-PCR法测定各组心肌细胞mRNA的含量显示：正常细胞组未检测到CVB3病毒，而益心康组和利巴韦林组在感染CVB3病毒48小时后CVB3病毒含量均低于病毒对照组；病毒对照组与益心康组和利巴韦林组比较，有显著性差异，益心康组心肌细胞病毒含量略低于利巴韦林组，益心康和利巴韦林比较无显著性差异。　　 结论　　 1、益心康具有保护心肌细胞，减轻心肌细胞病变的作用。　　 2、益心康具有提高心肌细胞存活率的作用，并且该作用优于利巴韦林。　　 3、益心康能降低心肌细胞CK-MB、cTnI的表达，具有减轻心肌损伤的作用，并且该作用优于利巴韦林。　　 4、益心康能降低CVB3病毒nRNA的表达，具有抑制CVB3病毒复制的作用，该作用与利巴韦林相当。