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题目：嘌呤受体P2X7对大鼠缺氧缺糖损伤海马脑片/突触体谷氨酸与γ-氨基丁酸释放的调控作用
[目的]观察嘌呤受体P2X7对大鼠缺氧缺糖海马脑片/突触体谷氨酸（Glu）、γ-氨基丁酸（GABA）释放的调控作用。
[方法]健康雄性SD大鼠150～200g，断颈处死后分离海马组织，0～4℃制备400μm厚脑片；另从海马匀浆液中分离、提取神经元突触体。应用经95％O2/5％CO2饱和的人工脑脊液（aCSF），35℃恒温孵育30 min使样本恢复活性。实验分三组进行（n=6/组）：
1）对照（Control）组，以95％O2/5％CO2饱和的aCSF孵育海马脑片及突触体；2）缺氧缺糖（OGD）组，脑片、突触体恢复活性后，即移至95％N2/5％CO2饱和的无糖aCSF中，并置于持续充以该混合气体（0.6 mL/min）的容器内，进行缺氧缺糖处理（Oxygen/glucose deprivation，OGD）；3）OGD+亮蓝G（BBG）组，将恢复活性后的两类样本移入含有P2X7受体特异性拮抗剂BBG（终浓度1μM）、经95％O2/5％CO2饱和的aCSF中孵育20 min，再移至2mL无糖无氧aCSF中（含相同浓度BBG），继续行OGD处理。分别于OGD0 min、OGD后20 min、40 min、60 min留取脑片样本与各组孵育液，检测海马组织中乳酸脱氢酶（LDH）的活力，并应用柱前衍生-电化学检测高效液相色谱（HPLC）法测定脑片和突触体孵育液Glu、GABA释放量。HE染色，光学显微镜下观察海马脑片在OGD前、后不同时间点的组织病理学改变。所有计量资料以均值±标准差（（）士s）表示，组内不同时点间应用方差分析；组间同一时点的比较采用t检验。P<0.05表示差异有统计学意义。
[结果]OGD组中，海马组织LDH释放量随缺氧缺糖时间延长而进行性升高（P<0.05）；在OGD+BBG组，缺氧缺糖40 min和60 min时点LDH释放量较OGD组显著降低（P<0.05）。HE染色显示，在OGD后各时间点，BBG均可减轻脑组织缺氧损伤。三组海马脑片、突触体在OGD前释放Glu、GABA无差异。与对照组相比，两处理组中海马及突触体Glu、GABA释放量在OGD后各时点显著增高（P<0.05）。加入BBG干预后，在缺氧缺糖40 min、60 min，海马脑片释放Glu较OGD组分别减少36.03％和42.60％，有统计学意义（P<0.05）；而OGD后不同时间，突触体Glu的释放量，在OGD+BBG组均显著增加（P<0.05）。与OGD组相比，OGD+BBG组内海马脑片GABA释放量仅于缺氧缺糖后60 min降低46.31％（P<0.05）；两处理组突触体间，在OGD各时点释放GABA均未见显著差异。
[结论]P2X7受体对海马组织GABA释放影响甚微，但通过介导Glu释放，参与了海马脑片缺氧缺糖性损伤。拮抗P2X7受体，对海马脑片缺氧缺糖性损伤有一定的保护作用。在神经元突触体，P2X7受体介导Glu释放的作用与海马组织中的效应相反，提示P2X7受体阻滞剂的保护作用可能主要定位于神经元以外细胞。抑制或拮抗P2X7受体，可能是治疗脑缺氧损伤的一个潜在性药物干预靶点。
[目的]观察嘌呤受体P2X7对大鼠缺氧缺糖海马脑片/突触体谷氨酸（Glu）、γ-氨基丁酸（GABA）释放的调控作用。
[方法]健康雄性SD大鼠150～200g，断颈处死后分离海马组织，0～4℃制备400μm厚脑片；另从海马匀浆液中分离、提取神经元突触体。应用经95％O2/5％CO2饱和的人工脑脊液（aCSF），35℃恒温孵育30 min使样本恢复活性。实验分三组进行（n=6/组）：
1）对照（Control）组，以95％O2/5％CO2饱和的aCSF孵育海马脑片及突触体；2）缺氧缺糖（OGD）组，脑片、突触体恢复活性后，即移至95％N2/5％CO2饱和的无糖aCSF中，并置于持续充以该混合气体（0.6 mL/min）的容器内，进行缺氧缺糖处理（Oxygen/glucose deprivation，OGD）；3）OGD+亮蓝G（BBG）组，将恢复活性后的两类样本移入含有P2X7受体特异性拮抗剂BBG（终浓度1μM）、经95％O2/5％CO2饱和的aCSF中孵育20 min，再移至2mL无糖无氧aCSF中（含相同浓度BBG），继续行OGD处理。分别于OGD0 min、OGD后20 min、40 min、60 min留取脑片样本与各组孵育液，检测海马组织中乳酸脱氢酶（LDH）的活力，并应用柱前衍生-电化学检测高效液相色谱（HPLC）法测定脑片和突触体孵育液Glu、GABA释放量。HE染色，光学显微镜下观察海马脑片在OGD前、后不同时间点的组织病理学改变。所有计量资料以均值±标准差（（）士s）表示，组内不同时点间应用方差分析；组间同一时点的比较采用t检验。P<0.05表示差异有统计学意义。
[结果]OGD组中，海马组织LDH释放量随缺氧缺糖时间延长而进行性升高（P<0.05）；在OGD+BBG组，缺氧缺糖40 min和60 min时点LDH释放量较OGD组显著降低（P<0.05）。HE染色显示，在OGD后各时间点，BBG均可减轻脑组织缺氧损伤。三组海马脑片、突触体在OGD前释放Glu、GABA无差异。与对照组相比，两处理组中海马及突触体Glu、GABA释放量在OGD后各时点显著增高（P<0.05）。加入BBG干预后，在缺氧缺糖40 min、60 min，海马脑片释放Glu较OGD组分别减少36.03％和42.60％，有统计学意义（P<0.05）；而OGD后不同时间，突触体Glu的释放量，在OGD+BBG组均显著增加（P<0.05）。与OGD组相比，OGD+BBG组内海马脑片GABA释放量仅于缺氧缺糖后60 min降低46.31％（P<0.05）；两处理组突触体间，在OGD各时点释放GABA均未见显著差异。
[结论]P2X7受体对海马组织GABA释放影响甚微，但通过介导Glu释放，参与了海马脑片缺氧缺糖性损伤。拮抗P2X7受体，对海马脑片缺氧缺糖性损伤有一定的保护作用。在神经元突触体，P2X7受体介导Glu释放的作用与海马组织中的效应相反，提示P2X7受体阻滞剂的保护作用可能主要定位于神经元以外细胞。抑制或拮抗P2X7受体，可能是治疗脑缺氧损伤的一个潜在性药物干预靶点。