论文部分内容阅读
研究目的：1、明确Cu/Zn-SOD (Copper/Zinc Superoxide dismutase,铜／锌超氧化物歧化酶)、Mn-SOD (Manganese Superoxide dismutase,锰超氧化物歧化酶)活性和MDA(Malondialdehyde,丙二醛)含量在正常人和肾上腺疾病患者外周血血清中的表达情况。2、明确Cu/Zn-SOD、Mn-SOD活性在正常肾上腺组织和肾上腺疾病组织中的表达情况。3、探讨Cu/Zn-SOD、Mn-SOD和MDA平衡失调所引发的机体氧自由基的产生和清除的平衡失调在肾上腺疾病发病中的作用,以及在不同肾上腺疾病间的表达差异,从而为肾上腺疾病的临床鉴别诊断提供新的手段。研究方法与结果：一、Cu/Zn-SOD、Mn-SOD活性和MDA含量在正常人和肾上腺疾病患者血清中的表达水平：选取广州军区广州总医院2008年1月～2009年3月因肾上腺疾病住院手术、术后经病理证实为肾上腺皮质增生、肾上腺皮质腺瘤、肾上腺嗜铬细胞瘤患者33例为病例组,其中肾上腺皮质增生患者12例,肾上腺皮质腺瘤患者10例,肾上腺嗜铬细胞瘤患者11例。正常对照组11例。入选者于晨起采空腹肘静脉血标本4ml。采用黄嘌呤氧化酶法测定患者血清中SOD活性水平,硫代巴比妥酸法检测患者血清中MDA含量。结果：①Cu/Zn-SOD、Mn-SOD、MDA在正常对照组、肾上腺皮质增生组、肾上腺皮质腺瘤组和肾上腺嗜铬细胞瘤组患者血清中均有不同程度表达。与正常对照组相比,病例组各组间Cu/Zn-SOD、Mn-SOD活性显著降低,MDA含量显著升高,差异有统计学意义(P<0.05)。②病例组各组间：肾上腺皮质腺瘤组Cu/Zn-SOD活性降低最为显著,与肾上腺皮质增生组、肾上腺嗜铬细胞瘤组相比,差异有统计学意义(P<0.05); Mn-SOD活性在肾上腺皮质腺瘤组和肾上腺嗜铬细胞瘤组中降低尤为显著,与肾上腺皮质增生组相比,差异有统计学意义(P<0.05)；肾上腺皮质腺瘤组和肾上腺嗜铬细胞瘤组MDA含量升高尤为显著,与肾上腺皮质增生组相比,差异有统计学意义(P<0.05)。二、Cu/Zn-SOD、Mn-SOD水平在正常和肾上腺疾病组织中的表达：运用免疫组织化学方法对广州军区广州总医院2008年1月～2009年3月提供的常规石蜡包埋组织块,其中肾上腺皮质增生患者12例,肾上腺皮质腺瘤患者10例,肾上腺嗜铬细胞瘤患者11例,对照组11例,分别进行Cu/Zn-SOD、Mn-SOD染色。新鲜标本经10%福尔马林固定18-24h,常规石蜡包埋,连续切片厚5μm,1张作HE染色,其余分别作Cu/Zn-SOD、Mn-SOD免疫组化染色。正常肾上腺作为阳性对照,PBS代替一抗作为阴性对照。阳性物均位于胞浆内,呈棕色。判断标准：阳性细胞面积占细胞总面积的百分比。比较肾上腺皮质增生皮质腺瘤、嗜铬细胞瘤和正常肾上腺等不同病例中Cu/Zn-SOD、Mn-SOD染色阳性细胞占细胞总数百分比之间的差异。结果：①Cu/Zn-SOD正常肾上腺髓质、肾上腺嗜铬细胞瘤表达呈阴性,而在正常肾上腺皮质、肾上腺皮质增生、肾上腺皮质腺瘤均有不同程度表达。与正常对照组皮质组织和肾上腺皮质增生组相比,Cu/Zn-SOD染色面积在肾上腺皮质腺瘤组织中表达显著降低,差异有统计学意义(P<0.05);②Mn-SOD则在正常肾上腺皮、髓质、肾上腺皮质增生、肾上腺皮质腺瘤和肾上腺嗜铬细胞瘤组织中均有不同程度表达,与对照组皮质相比,Mn-SOD染色面积在肾上腺皮质增生、肾上腺皮质腺瘤组织中显著降低,三者差异有统计学意义(P<0.05),而肾上腺皮质腺瘤组织的阳性细胞率最低。与正常对照组髓质相比,肾上腺嗜铬细胞瘤组Mn-SOD染色面积显著降低,两者差异有统计学意义(P<0.05)。三、Cu/Zn-SOD、Mn-SOD和MDA在血清和组织中表达的相关性分析(一)、Cu/Zn-SOD、Mn-SOD与MDA在血清学的相关性分析Cu/Zn-SOD活性与MDA含量在肾上腺皮质增生、肾上腺皮质腺瘤、肾上腺嗜铬细胞瘤组患者血清中表达呈负相关性,相关系数有统计学意义(r=-0.859、r=-0.831、r=-0.644, P<0.05)。Mn-SOD活性亦与MDA含量呈负相关性,相关系数有统计学意义(r=-0.817、r=-0.886、r=-0.714,P<0.05)。(二)、SOD血清学与组织学的相关性分析Cu/Zn-SOD血清学活性与组织中阳性细胞面积在肾上腺皮质增生、肾上腺皮质腺瘤呈正相关性,相关系数有统计学意义(r=0.823、r=0.821,P<0.05)。Mn-SOD血清学活性与组织学在肾上腺皮质增生、肾上腺皮质腺瘤、嗜铬细胞瘤亦呈正相关性,相关系数有统计学意义(r=0.934、r=0.803、r=0.804,P<0.05)。结论：1. Cu/Zn-SOD、Mn-SOD在肾上腺疾病血清和组织中活性降低和MDA含量升高,表明肾上腺疾病患者机体内氧自由基的产生和清除的平衡失调,这可能与肾上腺疾病的发病有关。2. Cu/Zn-SOD、Mn-SOD和MDA含量由正常肾上腺组织向肾上腺增生和肾上腺腺瘤或肾上腺嗜铬细胞瘤的发展过程中Cu/Zn-SOD、Mn-SOD经历了由高表达到低表达、MDA由低表达到高表达的过程。说明Cu/Zn-SOD、Mn-SOD表达差异可能肾上腺疾病的病理类型有关,对肾上腺皮、髓质疾病的鉴别诊断有重要作用。