黑线仓鼠(Cricetulus barabensis)微卫星引物的筛选及应用

来源 :曲阜师范大学 | 被引量 : 11次 | 上传用户:zmdwfh2008
下载到本地 , 更方便阅读
声明 : 本文档内容版权归属内容提供方 , 如果您对本文有版权争议 , 可与客服联系进行内容授权或下架
论文部分内容阅读
以野外捕捉的黑线仓鼠为材料,从肝脏组织中提取基因组DNA,以pUC19质粒为载体构建小片段基因组文库,利用PCR法从中筛选微卫星座位。在PCR法筛选中使用由(CA)8/(GA)8寡核苷酸引物和pUC19质粒多克隆位点两侧的M13PrimersM3和RV引物分别配对组成。通过对经过鉴定的3000多个克隆的筛选,获得65个可能含有微卫星的重组阳性克隆。测定这65个阳性克隆的序列,其中27个克隆序列不含有明显的微卫星;在其他38个克隆中共得到60个微卫星序列。首次得到的60个黑线仓鼠微卫星序列在GenBank注册,序列号为DQ235662,DQ270160,DQ270163,DQ270166,DQ270170~DQ270172,DQ286857~DQ286860,DQ270173~DQ270177,DQ342058~DQ342061,DQ459486~DQ459503。在60个微卫星中完美型36个,占60%;非完美型6个,占10%;复合型18个,占30%。在复合型中,复合完美型5个,复合非完美型13个。利用BLAST序列分析软件对GenBank数据库进行检索,没有发现同源性一致的相应微卫星序列,表明本文得到的黑线仓鼠微卫星序列都是首次发现的。此外,黑线仓鼠微卫星的重复次数主要集中在20次以下,而20次以上的比较少见。 从这60个微卫星序列中选取重复区域长、侧翼序列好的座位使用Lasergene6.0和Primer5.0软件设计微卫星序列引物,并事先设计好相应的参数,共设计出9对不含茎环和二级结构的引物,长度在18bp左右。将9对引物进一步经过8%聚丙烯酰胺凝胶电泳检验筛选,共获得5对具有多态性的引物,用这5对引物对曲阜市吴村、房山土门,平邑县蒙山三地的黑线仓鼠种群进行遗传多样性分析,平邑蒙山种群遗传多样性最高。遗传遗传距离和聚类分析发现,曲阜吴村、房山土门两地种群的遗传距离相对较小,但是总体而言三个种群之间遗传差异较小。为进一步开展黑线仓鼠种群分子生态学等研究建立了微卫星分子标记,从而为黑线仓鼠及其近缘种群的分子生物学研究奠定了基础。
其他文献
9月29日,龙江水院摄影协会成立十周年工作总结会议在龙江水院召开。会议由协会秘书长王洪刚主持,中国水利摄影家协会秘书长孙秀蕊到会致辞,宣布“中国水利摄影家协会黑龙江分
无线传感器执行器网络是由感应节点、执行节点和汇集节点组成的。网络中,感应节点负责监测、感知和采集监测对象的信息,并将信息传送到汇集节点。汇集节点根据收集的监测信息做
图像拼接技术是视频处理应用领域的一个热门研究课题,广泛应用于全景视图生成、智能监控、虚拟显示、双目视觉等多种应用场合,近年来得到了极大的关注。通常,图像拼接等视频处理
期刊
随着无线通信技术的发展,通信信号的频段高而且处理复杂,仅依靠传统的无线电系统已经很难满足多频带、多模式、可软件配置的需求。与传统的无线电系统相比,软件无线电的设计以一
在中、长期载人航天飞行期间,航天员失重性肌萎缩会对航天活动构成严重影响,是目前航天医学的重要研究领域之一。失重状态下的肌肉萎缩是多种因素综合引起的一种废用性退化,但其
移动通信系统的DOA定位技术是指利用接收到的无线信号来判定某一半径范围内发射信号终端实时位置的一种技术。在移动通信网络中,采用定位技术给用户提供所需的位置和方向等相
目的:本研究采用人脐静脉内皮细胞ECV304为靶细胞,观察钠泵抑制剂哇巴因(ouabain)对细胞死亡、细胞连接、细胞内游离Ca和活性氧自由基(ROS)的影响;检测哇巴因作用细胞前后钠泵α
作为满足人们自由通信需求的唯一杀手锏,无线通信技术在过去的数十年间取得了前所未有的大发展。时至今日,不断涌现的各种无线通信技术相互借鉴、相互融合,一时呈现“百家争鸣”
随着信息技术的飞速发展,信息安全已成为社会稳定和国家安全必须面对的敏感问题。信息隐藏作为一项新兴的保密技术,主要包括数字水印、信息隐写和匿名等分支,其中数字水印和信息