外源性硫化氢对烧伤大鼠体内miRNA-455水平影响的研究

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目的:探讨外源性硫化氢(H2S)是否可以调节烧伤血清干预下大鼠表皮细胞中miRNA-455含量及烧伤大鼠血清细胞中miRNA-455含量。方法:将大鼠及大鼠表皮细胞作为研究对象。动物层次:选取体重在350-400g之间雄性SD大鼠20只。将其随机分为3组:正常对照组、烧伤组、烧伤+Na HS组。其中烧伤组、烧伤+Na HS组经麻醉后背部制作烧伤面积为30%的III°烧伤模型。烧伤+Na HS组,分别于烧伤后1d、2d于腹腔注射56μmol/L的Na HS溶液0.4ml/100g。正常对照组、烧伤组、烧伤+Na HS组相同条件饲养,并于烧伤2d、3d后,腹主动脉采血,制备血清,提取各组血清中miRNA采用q PCR方法检测各组中miRNA-455含量。细胞层次:大鼠表皮细胞随机分为3组:正常组、烧伤血清组、烧伤血清+Na HS组。3组细胞同步化培养后,将3组细胞分别接种至6孔板中培养,正常组继续使用胎牛血清培养,烧伤血清组、烧伤血清+Na HS组,则使用10%烧伤大鼠血清培养基干预4h。在烧伤血清+Na HS组用浓度为150μmol/L的Na HS溶液分别干预1、4、24h后。提取各组表皮细胞总RNA采用q PCR方法检测各组中miRNA-455含量。结果:1.在同一时间点,动物层次:正常组与烧伤组之间差异在2d时即有统计学意义(P<0.05),烧伤组miRNA-455的表达水平明显高于正常组。细胞层次:正常组与烧伤血清组之间的差异在1h后有统计学意义(P<0.05),烧伤血清组miRNA-455的表达水平明显高于正常组。2.在同一时间点,动物层次:烧伤+Na HS组miRNA-455的表达水平明显低于烧伤组,(P<0.05),差异有统计学意义。细胞层次:烧伤血清组与烧伤+Na HS组进行比较,烧伤+Na HS组miRNA-455的表达水平明显低于烧伤血清组,(P<0.05),差异有统计学意义。结论:1.烧伤大鼠体内miRNA-455含量较正常大鼠体内miRNA-455含量明显升高。2.浓度为150μmol/L外源性Na HS干预,可明显降低烧伤大鼠表皮细胞内miRNA-455含量。3.浓度为56μmol/L外源性硫化氢Na HS干预,可明显降低烧伤大鼠血清细胞中miRNA-455含量。
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