生物条形码信号放大技术在肿瘤标记物CEA检测中的应用研究

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肿瘤标志物的检测涉及到癌症确诊、基因筛查、治疗评价等各个方面,与人类的生命安全息息相关。传统的检测肿瘤标记物的方法仪器昂贵、操作复杂、耗时费力。实现肿瘤标记物灵敏、高效、准确、便捷的检测是生化领域一直以来研究的热点。近几年来发展的基于各种纳米材料和核酸信号放大检测技术为此提供了新的契机。本研究论文将抗原抗体之间的免疫反应与DNA生物条形码信号放大技术相结合,构建了三种基于生物条形码信号放大的免疫传感器,并将其用于肿瘤标志物CEA(癌胚抗原)的检测。论文内容如下:(1)绪论部分首先以肿瘤标志物的检测对生命安全的重要意义为出发点,介绍了肿瘤标志物检测的几种主要方法及研究进展,同时介绍了生物条形码技术在生化分析领域的应用研究,并将生物条形码技术与传统分析检测方法进行对比。(2)构建了基于生物条形码信号放大的电化学免疫传感器检测hIgG。我们将电化学方法与生物条形码技术相结合,采用夹心型模式对hIgG进行了检测。此传感器利用纳米金具有较大比表面积和良好的导电性以及条形码放大信号的优点,极大地提高了灵敏度。突破了传统的免疫分析法检测hIgG时所存在的操作步骤繁琐、仪器设备昂贵的等缺点,并且检测限低、稳定性好,有望用于其它生化物质的检测。(3)构建了一种高效、灵敏的基于杂交链式反应的生物条形码信号放大的电化学免疫传感器检测CEA。利用杂交链式反应与电化学方法相结合,区别于其它DNA链延长反应,此方法无、需酶的参与,大大的缩短了反应时间及反应成本且信号变化明显。本方法具有通用性,只需改变待测物即可检测不同抗原或者其它肿瘤标志物。因此,该方法在肿瘤早期诊断领域具有广阔的应用前景。(4)构建了一种新颖的基于银纳米簇生物条形码信号放大的免疫传感器检测CEA。利用特殊DNA片段能够有效促进银纳米簇的生长,从而对待测物进行检测。此方法突破了以往的金标银染技术中复杂的操作步骤,实现了对待测物快速、简便的检测。该方法灵敏度高、操作简单、选择性好,有望用于其它肿瘤标志物的检测。
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