大孔吸附树脂分离纯化荷叶黄酮与生物碱研究

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荷叶为睡莲科(Nymphaeaceae)莲属(Nelumbo)植物之叶,主产于湖南、湖北、浙江、江苏等地,具有清热解暑、减肥降脂、升发清阳、凉血止血等多种功效,亦为国家卫生部卫监发(2002)第51号文件中的“既是食品又是药品”的药食两用植物资源。我国荷叶资源丰富,但利用程度低,局限于收集自然脱落干叶作为中草药煎剂或其它保健品的辅料阶段。随着社会生产力水平的提高、科学技术的进步和工业化、信息化的快速发展,人类健康正面临着生存环境和生活方式等诸多压力,以增进人类健康和提高人们生活质量为目标的植物提取物产业已成为世界范围内的朝阳产业。研究表明,荷叶黄酮与荷叶生物碱是荷叶中两种主要功能成分,随着人们对荷叶及其保健作用的认识和了解,对荷叶的深度开发利用正逐渐升温,但已有的研究大多集中在荷叶初制利用、探索荷叶化学成分、荷叶水提物药理功能、实验条件下分离提取荷叶黄酮与生物碱等方面,其研究深度和广度还远远不够,而且传统分离纯化方法大多为有机溶剂萃取,存在溶剂残留严重、缺乏安全性、成本较高等问题,寻找绿色、节能的分离纯化技术已成为高效、综合开发荷叶黄酮与生物碱的关键。大孔吸附树脂技术是近年发展起来的现代分离纯化技术,具有加工成本低、设备简单、节约能耗、可再生等优点,深受人们的推崇。试验针对荷叶黄酮与生物碱的开发利用现状,以干荷叶为原料,对几种大孔吸附树脂分离纯化荷叶黄酮与生物碱技术及其参数进行了筛选与优化,获得了如下结果:1、以荷叶黄酮粗提物为原料,比较研究了X-5、HP-20,NKA、AB-8及HPD-100等几种大孔吸附树脂对荷叶黄酮静态吸附与解吸效果,结果显示HP-20分离效果最好,静态饱和吸附量可达68.90 mg/g树脂,解吸率达87.23%。同时以此为基础,系统优化了HP-20大孔吸附树脂动态分离纯化荷叶黄酮的技术参数,结果表明:上样浓度为200 mg/mL,洗脱流速为2 BV/h时,40%乙醇对荷叶黄酮的洗脱能力较强,经过一次分离黄酮含量可达62.06%,此梯度黄酮的得率可达81.40%,荷叶黄酮的总得率为98.17%,经过再分离,荷叶黄酮含量可提高到98.87%。2、以荷叶干叶为原料,经30%乙醇提取后,通过对聚酰胺、D101、HP-20三种大孔树脂对荷叶生物碱静态吸附与解吸的比较,在筛选出一种具有较高吸附率与解吸量树脂的基础上,比较研究了不同洗脱流速下不同乙醇浓度梯度洗脱对生物碱洗脱量、纯度和得率的影响以及最优流速下不同乙醇浓度等梯度洗脱对生物碱洗脱量、纯度和得率的影响。结果表明,树脂D101是三种树脂中分离纯化荷叶生物碱的最佳树脂,利用树脂D101分离纯化荷叶生物碱时,以流速为1.50BV/h依次经3BV的20%、40%、60%和80%乙醇进行梯度洗脱的技术参数较好,其生物碱总量、总得率和总纯度最高,分别达到10.8226mg、62.9%和4.86%,当单独收集80%乙醇浓度以上的洗脱液时,荷叶生物碱的纯度可达32.56%,可以制备较高纯度的荷叶生物碱。综上所述,本研究从荷叶黄酮与荷叶生物碱提制中现存问题入手,对其进行了几种大孔吸附树脂分离技术的比较研究,获得了具有较好参考价值的大孔吸附树脂分离纯化荷叶黄酮与生物碱的技术参数,可为荷叶资源的高效、综合开发提供科学依据与数据参考。
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