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研究目的: 肺癌仍是当今严重威胁人类健康的最常见的恶性肿瘤之一,在全球范围内其发病率和死亡率呈不断上升趋势。肺癌的发生发展是外界危险因素刺激与个体遗传因素共同作用的结果。其中20s核心蛋白酶体复合物a亚基作为蛋白酶体一部分,研究显示在多种肿瘤的发生发展中有非常重要的作用,甚至目前已经在白血病等血液系统肿瘤中发现蛋白酶体抑制剂在治疗肿瘤中有很好的治疗效果,但20s核心蛋白酶体复合物a亚基在肺癌的发生发展中是否同样的作用,是否可作为一种新型免疫以及靶向治疗的靶点为肺腺癌的诊断以及治疗提供新的思路,目前尚未研究,因此,本研究将从20s核心蛋白酶体复合物a亚基(PSMAs家族蛋白)在肺腺癌表达水平差异出发,结合TCGA数据库、细胞实验以及临床特征以及病理学资料初步研究PSMAs家族蛋白表达与肺腺癌患者临床特征以及预后之间的相关性。 研究方法: 1、基于TCGA数据库,下载并处理肺腺癌数据集的mRNA表达RNA SeqV2数据,本研究共纳入病例578例,其中肺腺癌组织有518例,正常组织有60例。一方面,进行PSMAs基因簇相对表达量的分析,另一方面,同时下载临床信息数据,主要包括患者性别、年龄、吸烟史、临床分期、病理分期及生存状态等,进行PSMAs蛋白酶体家族基因在肺腺癌组织以及正常组织间表达差异分析以及其表达与患者临床病理以及预后之间的相关性分析; 2、通过细胞实验,利用人支气管上皮细胞Beas-2b细胞系、A549细胞系以及H1299细胞系以及Western blotting方法进一步研究PSMAs蛋白酶体家族蛋白在支气管上皮细胞以及癌症细胞之间表达的差异; 3、收集临床2015年5月至2018年5月之间在江苏省苏北人民医院确诊肺腺癌,并行手术治疗患者136例的临床特征以及生存随访资料,并收集他们手术中癌组织以及癌旁正常组织,进行石蜡包埋保存,进一步结合免疫组化法评估PSMAs蛋白酶体家族蛋白在癌组织以及癌旁组织之间的表达差异,并分析其表达差异对肺腺癌患者临床特征以及预后之间的相关性; 研究结果: 1、通过TCGA数据库结果分析,结果显示PSMAs蛋白酶体家族基因在肺腺癌组织明显高表达,与患者淋巴结浸润、TNM分期以及预后生存状态存在显著相关性,差异有统计学意义(P<0.05);并且PSMAs蛋白酶体家族基因表达高低对患者总生存期(OS)以及无进展生存期(RFS)存在明显的影响,高表达组生存期明显低于低表达组,差异有统计学意义(P<0.05)。 2、基于Beas-2b、A549以及H1299细胞实验,结果显示在A549和H1299癌细胞,PSMAs蛋白酶体家族蛋白的表达明显高于Beas-2b支气管上皮细胞。 3、临床数据结果与TCGA数据库分析结果类似,PSMAs蛋白酶体家族基因在肺腺癌组织明显高表达,并且与患者癌细胞的局部浸润、淋巴结浸润、TNM分期以及预后生存状态存在明显相关性,差异有统计学意义(P<0.05);并且PSMAs蛋白酶体家族基因表达高低对患者总生存期(OS)以及无进展生存期(RFS)存在明显的影响,高表达组生存期明显低于低表达组,差异有统计学意义(P<0.05)。 4、免疫组化结果显示,肺腺癌患者癌组织较癌旁正常组织,PSMAs蛋白酶体家族蛋白的表达明显增高。 研究结论: 1、PSMAs蛋白酶体家族蛋白在肺腺癌组织较癌旁组织表达明显增高。 2、PSMAs蛋白酶体家族蛋白在肺腺癌组织表达的增高与肺腺癌患者癌细胞的局部浸润、淋巴结浸润、TNM分期、分期以及预后生存状态存在明显相关性; 3、PSMAs蛋白酶体家族基因表达高低对患者总生存期(OS)以及无进展生存期(RFS)存在明显的影响。