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目的:建立准确的血浆β-淀粉样蛋白42(β-amyloid42,Aβ42)寡聚体抗体酶联免疫吸附测定(Enzyme linked immunosorbent assay,ELISA)方法,用于献浆人群 Aβ42抗体含量筛查。为制备富含Aβ42抗体的特异性静脉注射免疫球蛋白(Intravenous Immunoglobulin,IVIg)奠定基础。方法:1.利用人工合成的Aβ42肽段在不同起始聚合浓度及磷酸盐缓冲液(Phosphate Buffered Saline,PBS)中添加 0.05%十二烷基硫酸钠(Sodium dodecyl sulfate,SDS)条件下制备Aβ42寡聚体,再通过SDS-聚丙烯酰胺凝胶(SDS-polyacrylamide gel electrophoresis,SDS-PAGE)和蛋白质印迹法(Western blot,WB)对制备的Aβ42寡聚体进行鉴定,从而筛选出较优的合成方法。2.预实验筛选出对ELISA检测血浆Aβ42寡聚体抗体影响较大的因素,设计正交实验,确立检测体系,并进行性能评估。3.检测血浆样本中Aβ42寡聚体抗体水平,分析其分布特征。结果:1.Aβ42寡聚体生成量随着Aβ42起始浓度的升高而增加。无SDS制备条件250、125及62.5 μmol/L浓度的Aβ42下能生成三聚体及中、高分子量的寡聚体弥散带;SDS制备条件250、125、62.5μmol/L浓度的Aβ42可生成三聚体及中等分子量的寡聚体。2.经正交分析发现Aβ42寡聚体包被浓度(0.2 μg/孔)、包被pH(6.0)、包被离子浓度(0.01mol/L)、封闭液(15%BSA)、一抗(4℃过夜)、二抗(1/2000、25℃/3h)条件组成的检测体系效果更佳,相关系数为0.994;稳定性相对偏差为3.5%、精密度相对偏差4.77%及准确性误差为10.16%,均达到美国临床和实验室标准协会(Clinical and Laboratory Standards Institute,CLSI)及其他标准要求。3.检测四川、贵州两地部分献浆人血浆发现,女性Aβ42寡聚体抗体比男性高10.1%;Aβ42寡聚体抗体水平随岁数增加呈增高的趋势。贵州地区Aβ42寡聚体抗体水平比四川地区高25.0%;ABO血型差异无统计学意义。此外,贵州地区高值样本比例高于四川地区。结论:1.适合的起始聚合浓度有利于Aβ42寡聚体的生成。PBS中添加0.05%的SDS有利于生成稳定的Aβ42寡聚体。2.正交所得的ELISA检测体系性能稳定,能用于样本血浆检测。3.Aβ42寡聚体抗体分布存在明显的性别、年龄、地区差异,血浆筛查能够得到Aβ42寡聚体抗体水平高的血浆。