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马度米星铵是由马杜拉放线杆菌发酵产生的一种聚醚类离子载体抗生素,对球虫的子孢子及第一代裂殖体均具有活性。在饲料中低剂量添加还具有促进家禽生长,提高肉牛饲料利用率的作用,是家禽养殖业中使用最广泛的抗生素类抗球虫药之一。现如今由于抗生素使用不当而引起的抗生素在土壤和水环境中残留的现象正威胁着人类和动物的健康。目前,国内外暂无马度米星铵在水产动物体内药动学和残留消除规律的研究。本试验建立了克氏原螯虾血淋巴、肌肉、肝胰腺中马度米星铵含量检测的HPLC-MS/MS法,并利用该检测技术研究马度米星按分别以口服和药浴给药后在克氏原螯虾体内的药物动力学特征及残留消除规律。1克氏原螯虾血淋巴中马度米星铵含量的UPLC-MS/MS检测方法研究克氏原螯虾血淋巴样品经乙腈提取后,利用超高效液相色谱串联质谱在电喷雾正离子(ESI+)条件下选用多反应监测(MRM)模式进行待测物的分析,采用内标法定量。本试验建立的方法的检测限(LOD)和定量限(LOQ)分别为6 ng.mL-1、20 ng.mL-1,在20～8000 ng·mL-1的浓度范围内,峰面积比与药物浓度之间的线性关系良好(R2>0.99),回归方程为y=0.0976848x+0.743946。克氏原螯虾血淋巴的药物添加回收率为93.1%～107.8%,日内精密度及日间精密度小于10.1%。本试验建立的方法灵敏度高、专属性强、重复性好,可用于克氏原螯虾血淋巴中马度米星铵含量的测定。2马度米星铵在克氏原螯虾体内的药动学试验156尾雄性克氏原螯虾,随机分成两组,分别按350、700μg·kg-1 bw剂量灌服马度米星铵溶液。每组分别于给药后于0.083,0.167,0.25,0.5,1,2,4,8,24,48,72,96 h随机采集6尾克氏原螯虾血淋巴。各样品经UPLC-MS/MS检测后用WinNonLin 5.2软件进行药物动力学分析。高剂量组参数如下:Ti/2λz=28.75±9.81 h,Tmax=0.58±0.20h,Cmax=289.55±156.20ng·mL-1;低剂量组参数如下:T1/2λz=31.80±7.98h,Tmax=0.42±0.13h,Cmax=88.29±61.23 ng·mL-1。3克氏原螯虾可食性组织中马度米星铵残留量的UPLC-MS/MS检测方法研究克氏原螯虾可食性组织(肌肉、肝胰腺)经高速剪切仪匀浆后,用乙腈提取,HLB固相萃取柱净化,在电喷雾正离子(ESI+)条件下选用多反应监测(MRM)模式进行待测物的分析,内标法定量。该方法的检测限(LOD)与定量限(LOQ)分别为6 μg·kg-1、20 μg·kg-1,在20～8000μg·kg-1的浓度范围内,峰面积与浓度呈良好的线性关系(R2>0.99),药物在肝胰腺和肌肉中的回归方程分别为y=0.0979752x+0.499055,y=0.0891236x+0.65948。克氏原螯虾肌肉、肝胰腺组织中的药物添加回收率为74.2%～110.4%,日内精密度及日间精密度小于10.1%。本试验建立的方法灵敏度高、专属性强、重复性好,可用于克氏原螯虾肌肉和肝胰腺组织中马度米星铵含量的测定。4马度米星铵在克氏原螯虾体内的残留消除试验132只克氏原螯虾随机分成两组,通过药浴的方式进行给药。药浴液浓度分别为7 mg·L-1、3.5 mg·L-1。药物吸收阶段和清除阶段的持续时间分别为3d、5d。采集不同时间点的克氏原螯虾肝胰腺和肌肉组织,经提取、净化和浓缩后用液相色谱串联质谱仪检测,内标法定量。克氏原螯虾组织中马度米星铵在药浴给药后的第三天即达到稳态浓度。药物在肌肉和肝胰腺中的消除时间分别为3 d和5 d,肝胰腺中的药物浓度高于肌肉中的药物浓度。试验结果用休药期计算软件WT1.4分析,休药期为25.8℃·d。