【摘 要】
：
该实验室已进行的血管生长素(Angiogenin,简称ANG)基因工程研究所获得的M13mp/ANG基因的基础上,利用化学合成的寡聚核苷酸片段,采用掺"U"法对ANG活性位点进行定点 诱变,同位
论文部分内容阅读
该实验室已进行的血管生长素(Angiogenin,简称ANG)基因工程研究所获得的M13mp/ANG基因的基础上,利用化学合成的寡聚核苷酸片段,采用掺"U"法对ANG活性位点进行定点 诱变,同位素杂交筛选、DNA自动测序鉴定,得到ANG的衍生物Asp116His(D116H)突变子.采用EcoR1、BamH1双酶切,pBV220作为表达载体重组转化构建了TG1/pBV220/D116H-ANG基因工程菌,经42C诱导表达5.5小时,D116H-ANG蛋白表达量可达36％,该蛋白在TGⅠ中是以无 活性的包涵体形式表达的.进一步破菌分离包涵体,采用Urea等变性剂对包涵体进行超声洗涤,可使蛋白含量提高到70％左右.在此基础上采用阴阳离子交换层析、分子筛凝胶层析等技术分离纯化,D116H-ANG蛋白含量可进一步提高到95％.纯化后的蛋白,采用氧化还原反 应法复性,鸡胚绒毛尿囊膜(CAM)法检测复性效果.及其生物活性水平.经多次检测认为其 活性水平达到0.02ng/枚,是野生形ANG活性水平的30倍.说明该突变体比野生型有更高的生物活性,并有更大的医疗应有价值.
其他文献
园林工程是改善城市环境,实现绿色生态发展的有效措施,而树木栽培工作是园林绿化施工的关键,树木栽植的质量很大程度上决定了园林工程的整体效益.然而,在现实工作中,基于工期
伴随着社会经济的不断进步与发展,人们的生活水平得到了普遍的提高,生活质量更是得到了质的飞跃.人们不再满足于普通的物质需求,相反的,他们更加追求高质量和高品质的生活.从
混凝土是当代建筑施工进程当中非常重要的核心性材质,混凝土施工的品质对于相关的建筑项目的建设成果而言有着重要的影响性作用.在建筑项目的施工进程当中,需要充分的结合多
在整个土木工程的施工过程中,为整体优化施工质量,全面提升施工成效,应该加强施工过程的质量控制与管理,尤其是要做好施工过程细节方面的科学管控,以此来综合性提升土木工程
该文利用扫描电镜技术、常规石蜡切片和滑走切片技术以及离析法等手段,对中国木兰科植物营养器官和繁殖器官的微形态首次进行了系统研究.材料涉及到8属45种,不同微形态性状指
诱向因子是一类在神经系统发育或损伤后再生过程中,具有促进神经元细胞存活和诱导神经元细胞定向生长的蛋白质.1995年顾晓松孝授等应用神经细胞联合培养实验,发现了四类分子
在地球环境污染、能源危机日益严峻的背景下，传统的燃油汽车能源消耗和尾气的大量排放已不能适应节能减排的需要，零排放和低噪音的电动汽车的得到了世界各国的推崇，这对电动汽车