【摘 要】
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白叶枯病(Xanthomonas oryzae pv.oryaze)是世界水稻生产中最严重的细菌性病害之一,化学防治不仅难以奏效,而且容易造成环境污染,利用品种抗性种植抗病品种就成为最经济有效
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白叶枯病(Xanthomonas oryzae pv.oryaze)是世界水稻生产中最严重的细菌性病害之一,化学防治不仅难以奏效,而且容易造成环境污染,利用品种抗性种植抗病品种就成为最经济有效的防治方法.水稻抗白叶枯病基因Xa23来自于中国普通野生稻,对菲律宾、日本的白叶枯病鉴别菌系和中国7个病原型都表现为高抗.与其它白叶枯病基因相比,Xa23基因具有显性、全生育期抗性的特点,从分子水平研究其抗病机理有重要的理论和实践意义.该研究以水稻抗白叶枯病近等基因系CBB23(含有白叶枯病抗性基因Xa23)和JG30(培育CBB23的轮回亲本)为试材,运用SSH(抑制性差减杂交)的方法比较了CBB23和JG30基因转录水平上的差异,克隆出1667个差异表达的cDNA片段,构建了cDNA抑制差减文库,制备成cDNA微阵列(cDNA microarrays).利用反向Northern Bloting鉴定出13个阳性克隆,其中Rbb1、Rbb2、Rbb6和Rbb7四个序列在CBB23中表达增强,为Xa23诱导表达;Rbb3、Rbb4、Rbb5、Rbb8、Rbb9、Rbb10、Rbb11、Rbb12和Rbb13共九个序列在JG30中表达增强,为Xa23抑制表达.植物的抗病机理非常复杂,其主要反应之一就是代谢上的变化,例如,在利用cDNA微阵列对水稻抗稻瘟病近等基因系的分析中,检测到了很多与光合作用和糖代谢功能有关的差异表达片段;在小麦中也筛选到一个植物中ATP酶具有高度同源性的cDNA序列可能与小麦抗白粉病相关.所以,通过反向Northern Blot从Xa23近等基因系的cDNA抑制差减文库中筛选得到的Rbb1,经RT-PCR进一步表明其在CBB23中的表达受白叶枯病菌接种诱导,RACE获得全长cDNA,推测该基因编码的H+-ATP合酶亚基蛋白可能与水稻抗白叶枯病相关.
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