【摘 要】
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核仁选择性成像有助于观察细胞不同状态时的核仁结构和特征,在疾病早期诊断及治疗、设计靶向传递系统等方面发挥着至关重要的作用。碳点良好的光稳定性、低毒性、可调节的表面基团使其在生物成像领域具有潜在的应用。虽然已有研究发现制备出的碳点具有核仁靶向性,但核仁标记性碳点的制备通常是通过试错法来实现的,并没有明确的设计原则。因此,制备核仁靶向性碳点仍是一大挑战。本文通过选择不同前驱体制备了一系列碳点,筛选出具
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核仁选择性成像有助于观察细胞不同状态时的核仁结构和特征,在疾病早期诊断及治疗、设计靶向传递系统等方面发挥着至关重要的作用。碳点良好的光稳定性、低毒性、可调节的表面基团使其在生物成像领域具有潜在的应用。虽然已有研究发现制备出的碳点具有核仁靶向性,但核仁标记性碳点的制备通常是通过试错法来实现的,并没有明确的设计原则。因此,制备核仁靶向性碳点仍是一大挑战。本文通过选择不同前驱体制备了一系列碳点,筛选出具有核仁靶向性能的碳点,研究影响其靶向性的因素,为核仁靶向性碳点的制备提供方法与思路。对核仁靶向性碳点m-l CDs的特点进行探索,利用其极性敏感性对细胞内极性进行检测。主要研究内容包括以下三个方面:(1)碳源及氮源对碳点靶向功能影响的研究。选取不同的碳源及氮源作为前驱体,制备了一系列碳点。筛选出具备核仁靶向能力的碳点,以探索影响其核仁靶向性能的因素为目标,对它们的细胞标记能力及自身化学性质进行分析研究,发现碳源间苯二胺的苯环结构与碳点的核仁靶向性能之间具有相关性。通过选择与间苯二胺结构相似的含有苯环的两种同本异构体作为碳源制备碳点,进行对比实验,验证了苯环结构的存在并不是碳点具有核仁靶向性的唯一因素。间苯二胺作为碳源是碳点具有核仁靶向性能的关键因素,且氮含量也对碳点的核仁靶向性能具有一定影响。(2)氮含量对核仁靶向性碳点m-l CDs性能影响的研究。制备含氮量不同的m-l CDs进行分析研究。随着氮含量的减少,m-l CDs的荧光强度逐渐降低,对核仁靶向性变差。碳源与氮源的摩尔比为1:0.5时,m-l CDs具有优异的核仁靶向性,且成像效果好。制备的m-l CDs选择性进入细胞核仁,与核仁中的RNA相结合,在细胞中的内化依赖于温度、ATP、和微胞吞作用。m-l CDs良好的特异性、高生物相容性、高核仁靶向性和清晰的核仁成像效果,使其有望作为细胞核仁成像探针应用于生物医学领域。结合第一部分结论,间苯二胺作为碳源与一定量的氮源相结合作为前驱体,可制备出具有核仁靶向性能的碳点,为核仁靶向性碳点的设计提供了思路与方法。(3)提出将m-l CDs应用于细胞内极性检测中。m-l CDs对极性波动敏感,随着溶剂极性的增加最大发射光谱会发生红移。在极性参数△f为0.189-0.32范围内,m-l CDs在溶液中的荧光强度与△f具有相关性,在极性参数△f为0.28-0.32的范围内具有线性相关性,可以对溶液中的极性进行检测。在细胞实验中,细胞内极性不同时,m-l CDs染色细胞后荧光强度不同,因此m-l CDs可作为观察细胞中极性变化的一种探针。
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